PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响

发布时间：2019-01-09 08:48

【摘要】：目的研究PI3K-Akt-mTOR信号通路对Foxp3基因表达的影响。方法将SPF级昆明系小鼠60只随机分为对照组(A)和实验组(B、C、D),B、C、D三组分别灌胃雷帕霉素0.2、0.4、0.6 mg.d-1,A组每天予以无菌水灌胃,共3周。3周后,无菌条件下心脏采血,EDTA抗凝,分离脾脏,制备单细胞悬液,采用流式细胞仪检测小鼠外周血和脾脏中CD4+CD25+调节性T细胞水平(CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的百分比),RT-PCR检测小鼠脾细胞Foxp3mRNA的表达,免疫组织化学SP法染色观察小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的变化,并利用计算机图像分析技术测量各实验组及对照组中p-mTOR蛋白表达的平均光密度。结果 Foxp3 mRNA在实验组(B、C、D)小鼠脾脏中表达的程度分别为(0.4853±0.0574、0.7886±0.1085、0.9639±0.2015),明显高于对照组A(0.1345±0.0271)(P0.05);实验组(B、C、D)小鼠脾脏中p-mTOR蛋白表达的平均光密度分别为(0.2326±0.0431、0.1156±0.0223、0.0556±0.0041),明显低于对照组A(0.4223±0.0534)(P0.05);两指标经pearson相关分析,小鼠脾脏中Foxp3mRNA的表达与p-mTOR蛋白表达呈负相关。结论抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路会促使Foxp3的表达增强;PI3K-Akt-mTOR信号通路的激活程度与Foxp3的表达程度呈负相关。
[Abstract]:Objective to study the effect of PI3K-Akt-mTOR signaling pathway on Foxp3 gene expression. Methods 60 Kunming mice of SPF grade were randomly divided into two groups: control group (A) and experimental group (group D). After 3 weeks, blood was collected from the heart, EDTA was anticoagulant, spleen was isolated and single cell suspension was prepared under aseptic condition. The levels of CD4 CD25 regulatory T cells (the percentage of CD4 CD25 Treg cells in CD4 T cells) in peripheral blood and spleen of mice were detected by flow cytometry, and the expression of Foxp3mRNA in spleen cells of mice was detected by RT-PCR. Immunohistochemical SP staining was used to observe the expression of p-mTOR protein in the spleen of mice, and the average optical density of p-mTOR protein expression in each experimental group and control group was measured by computer image analysis. Results the expression of Foxp3 mRNA in the spleen of the experimental group was (0.4853 卤0.0574) 0.7886 卤0.1085 卤0.9639 卤0.2015, which was significantly higher than that of the control group A (0.1345 卤0.0271) (P0.05). The average optical density of p-mTOR protein expression in the spleen of the experimental group was (0.2326 卤0.0431) 0.1156 卤0.022 3n 0.0556 卤0.0041, which was significantly lower than that of the control group A (0.4223 卤0.0534) (P0.05). By pearson correlation analysis, the expression of Foxp3mRNA in mouse spleen was negatively correlated with the expression of p-mTOR protein. Conclusion inhibition of PI3K-Akt-mTOR signaling pathway can increase the expression of Foxp3, and the activation of PI3K-Akt-mTOR signaling pathway is negatively correlated with the expression of Foxp3.
【作者单位】： 安徽医科大学第一附属医院心脏血管外科;
【分类号】：R-332

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10 王弘s，

本文编号：2405400