脂多糖对人蜕膜细胞中PR及TNF-α表达影响的研究

发布时间：2019-02-17 10:14

【摘要】：目的：通过采用脂多糖作用体外培养人蜕膜细胞,研究脂多糖对人蜕膜细胞中孕激素受体(PR)和TNF-a的表达改变,探讨细菌感染导致自然流产的发病机理。 方法：收集正常早孕人工流产病例10例,分离人原代蜕膜细胞,用免疫细胞化学法检测胎盘泌乳素鉴定蜕膜基质细胞。取培养传代第4、5代细胞加入脂多糖(其终浓度分别为25ng/ml 50ng/ml 100ng/ml 200ng/ml)处理24h为实验组一至四组,仅加入细胞培养液为对照组。采用激光共聚焦-细胞免疫荧光技术检测各组蜕膜细胞中PR及TNF-α的Cy3荧光表达,用Image J图像分析软件分析PR及TNF-α的荧光强度,采用SPSS17.0统计软件包进行数据分析,用随机区组设计方差分析比较不同浓度LPS对蜕膜细胞中PR及TNF-α表达的变化。并用线性相关分析法对各组蜕膜细胞的PR及TNF-α的表达进行相关性分析。 结果：1.人原代蜕膜细胞体外培养分离成功,经免疫细胞化学检测蜕膜细胞胎盘泌乳素阳性率95%。2.实验组蜕膜细胞中PR平均荧光强度较对照组明显降低,且随着脂多糖浓度逐渐增加,PR的平均荧光强度降逐渐降低,差异显著性,P0.01,有统计学意义。3.实验组蜕膜细胞中TNF-α平均荧光强度较对照组明显增强,且随着脂多糖浓度增大,蜕膜细胞内TNF-α荧光强度逐渐增强,差异有显著性,P0.01,有统计学意义。4.蜕膜细胞中,PR与TNF-α表达呈负相关(r=-0.841,P0.01) 结论：1.脂多糖使体外培养的人蜕膜细胞中PR表达减少,脂多糖浓度越高,PR越低。2.脂多糖促进人蜕膜细胞的TNF-α的表达增加,脂多糖浓度越高,TNF-a表达越高。3.体外培养人蜕膜细胞中PR与TNF-α表达呈负相关。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression of progesterone receptor (PR) and progesterone receptor (TNF-a) in decidua cells cultured in vitro by lipopolysaccharide (LPS), and to explore the pathogenesis of spontaneous abortion induced by bacterial infection. Methods: human decidual cells were isolated from 10 cases of normal early pregnancy induced abortion, and placental prolactin was detected by immunocytochemistry to identify decidua stromal cells. The cells in the 4th passage were treated with lipopolysaccharide (25ng/ml 50ng/ml 100ng/ml 200ng/ml) for 24 hours as the experimental group, and only the cell culture medium was added as the control group. The Cy3 fluorescence expression of PR and TNF- 伪 in decidual cells was detected by laser confocal cell immunofluorescence technique. The fluorescence intensity of PR and TNF- 伪 was analyzed by Image J image analysis software, and the data was analyzed by SPSS17.0 software package. The changes of PR and TNF- 伪 expression in decidual cells with different concentrations of LPS were compared by random block design analysis of variance. The expression of PR and TNF- 伪 in decidual cells were analyzed by linear correlation analysis. Results: 1. Human primary decidual cells were isolated successfully in vitro. The positive rate of prolactin in placenta of decidual cells was detected by immunocytochemistry. The average fluorescence intensity of PR in decidual cells in the experimental group was significantly lower than that in the control group, and with the increase of lipopolysaccharide concentration, the average fluorescence intensity of PR decreased gradually, the difference was significant (P 0.01, P < 0.05). The average fluorescence intensity of TNF- 伪 in decidual cells in the experimental group was significantly higher than that in the control group, and with the increase of lipopolysaccharide concentration, the fluorescence intensity of TNF- 伪 in decidua cells gradually increased, the difference was significant (P 0.01, P < 0.05). There was a negative correlation between PR and TNF- 伪 expression in decidual cells (r-0.841, P0.01). Conclusion: 1. Lipopolysaccharide reduced the expression of PR in cultured human decidua cells. The higher the concentration of lipopolysaccharide, the lower PR was. Lipopolysaccharide promoted the expression of TNF- 伪 in decidual cells. The higher the concentration of lipopolysaccharide, the higher the expression of TNF-a. There was a negative correlation between PR and TNF- 伪 expression in human decidual cells cultured in vitro.
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329

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本文编号：2425062