外源性NGF对大鼠脑出血的有效性研究

发布时间：2019-02-17 10:24

【摘要】：目的：探讨利用Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型，使之成为一种稳定有效，可重复的脑出血模型方法。 方法：雄性SD大鼠48只随机分为实验组和对照组，将等体积Ⅶ型胶原酶和无菌生理盐水分别注入实验组和对照组大鼠尾壳核。通过观察两组大鼠在第1、3和7天不同时间点的神经功能缺损变化，最后处死后脑部尾壳核形成的血肿体积大小以及脑组织化学改变。 结果：实验组大鼠都有神经功能缺损明显，尾壳核有明显出血灶，而对照组神经体征不明显，尾壳核未见明显出血，两组相比较具有明显统计学意义（p＜0.05）。同样，切片HE染色中可见穿刺道大量红细胞存在，血肿周围细胞水肿明显。而对照组仅见穿刺针道有少许血细胞存在。 结论：Ⅶ型胶原酶制作大鼠脑出血模型是一种成功的稳定的可重复的方法。 目的：探讨外源性NGF对大鼠脑出血的作用机制。 方法：将SD大鼠随机分成三组，即假手术组、对照组和NGF组。对照组和NGF组均按第一部分造模方法所述以Ⅶ型胶原酶制备脑出血模型，假手术组只将给予头皮切开，不做任何处理便缝合皮肤。NGF组是经孔给予2μl混有300uNGF的生理盐水缓慢注入，对照组则给予2μl无菌生理盐水，，假手术组不给予NGF或无菌生理盐水。术毕观察三组大鼠神经功能缺损变化，按第1、3和7天三个时间点处死大鼠，处死前给予BrdU抗体按50mg/kg行腹腔注射，4%多聚甲醛前固定鼠脑，取出脑组织后再以4%多聚甲醛后固定，20%和30%蔗糖液脱水，锡纸包裹后冻存于-80℃冰箱中。再做10μm厚的冰冻切片，将冰冻切片行免疫组化检测，在光学显微镜下计数新生神经元细胞（Nestin抗体标记）数目、新生血管数目（VEGF抗体标记）以及含BrdU的增殖神经元的数目，最后将各组数据性统计学分析。 结果：假手术组神经功能缺损评分前后均为0分；对照组造模后有明显神经功能缺损，但后期神经功能恢复缓慢；NGF组在给予NGF后神经功能缺损评分有改善，第7天时间点改善最明显，统计学分析有意义（P＜0.05）。将实验组与对照组及假手术组比较，经免疫组化染色检测，实验组Nestin抗体标记和VEGF抗体标记阳性细胞均增多，有统计学意义（P＜0.05）。 结论：通过本实验结果说明外源性NGF能激活脑出血模型大鼠的内源性神经干细胞（NSCs），并促进其增殖分化为神经神经细胞。同时能促进颅内神经细胞分泌VEGF，而免疫组化检测进一步说明NGF从细胞水平促进了脑出血大鼠的神经功能的恢复。
[Abstract]:Objective: to explore a stable, effective and repeatable method for making intracerebral hemorrhage model in rats using collagenase 鈪

本文编号：2425071