波生坦对左向右分流肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

发布时间：2019-02-25 21:08

【摘要】：目的：先心病肺动脉高压(PAH)是由于肺血管重构导致的，以肺动脉压力和肺血管阻力进行性升高为特征的病理综合征，最终导致右心功能衰竭甚至死亡。在肺动脉高压患者及肺动脉高压动物模型中，血浆内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)水平升高，肺组织内皮素系统激活。ET-1是一种主要由血管内皮细胞释放的强效缩血管活性肽和促血管平滑肌细胞分裂原，是目前已知作用最强效应最持久的缩血管物质，同时促进多种细胞增殖参与肺血管重构。ET-1通过与ETA受体和ETB受体结合发挥生物活性。在肺动脉高压动物模型中证实ET受体拮抗剂具有治疗作用。波生坦(bosentan,BST)是一种口服ETA/B受体拮抗剂，研究发现它能够明显改善肺动脉高压患者症状、运动耐量、血流动力学、动态心电图参数和肺动脉高压患者的预后，但国内外关于其对肺血管重构影响的研究甚少。本实验旨在建立大鼠腹主动脉-腔静脉分流模型，模拟先心病左向右分流肺动脉高压，从形态学及分子水平探讨肺血管重构机制；并给予波生坦药物干预，观察波生坦对肺血管重构的影响，从而为临床治疗先心病肺动脉高压提供依据。方法：雄性SD大鼠24只，随机分为对照组(control组)、肺动脉高压组(PAH组)、波生坦组(BST组)，每组8只。对照组仅做“假手术”对照，PAH组和BST组进行腹主动脉-下腔静脉造瘘手术，建立左向右分流肺动脉高压大鼠模型。饲养3周后，从第4周开始BST组每天给予波生坦(100mg/kg)灌胃干预，其余两组给予生理盐水灌胃，，继续饲养3周。6周后所有大鼠测定：平均动脉压(MAP)、平均肺动脉压(mPAP)、右室收缩压(RVSP)、右心室收缩压上升最大速率(dp/dtmax)、右心室肥厚指数：右心室质量/(左心室质量+室间隔质量)[RV/(LV+S)]、右心室质量/体重(RV/BW)及(左心室+室间隔质量)/体重[(LV+S)/BW]；酶联免疫法测定血浆ET-1水平；免疫组化法观察肺动脉ETA和ETB受体表达；图像分析：测量ETA和ETB受体平均光密度(AOD)、15～50μm肺小动脉百分比，同时测量50～100μm和101～150μm肺小动脉管壁厚度占血管外径的百分比(WT%)和管壁面积占血管总面积的百分比(WA%)；光镜下观察肺动脉病理形态改变。结果： 1血流动力学的测定与对照组比较，PAH组大鼠mPAP、RVSP和dP/dtmax均升高(P0.05)；与PAH组比较，BST组大鼠mPAP和RVSP降低(P0.05)。三组MAP比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 2各心室的相对重量与对照组相比，PAH组大鼠RV/BW和(LV+S)/BW升高(P0.05)；BST组大鼠RV/BW和(LV+S)/BW与对照组和PAH组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。三组RV/(LV+S)和BW比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 3血浆ET-1水平 PAH组血浆ET-1水平显著高于对照组(P0.01)；而BST组血浆ET-1水平与对照组(P0.01)和PAH组(P0.05)比较显著升高。 4肺动脉ETA及ETB受体表达 ETA受体阳性物在肺动脉平滑肌细胞上表达, ETB受体阳性物大部分在肺动脉内皮细胞上表达，少量在平滑肌细胞上表达，阳性物显棕黄色颗粒。PAH组ETA受体AOD高于对照组(P0.05)，给予波生坦干预后AOD低于PAH组(P0.05)，与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。PAH组ETB受体AOD显著低于对照组(P0.01)，给予波生坦干预后AOD显著高于PAH组(P0.01)，但低于对照组(P0.05)。 515～50μm肺小血管百分比 PAH组肌性动脉与部分肌性动脉百分比显著高于对照组与BST组(P0.01)；非肌性动脉百分比显著低于对照组和BST组(P0.01)。BST组肌性动脉、部分肌性动脉、非肌性动脉百分比与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)。 6肺动脉WT%和WA%的测定 PAH组101～150μm肌性动脉WT%显著高于BST组与对照组(P0.01)，BST组101～150μm肌性动脉WT%与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05)；PAH组50～100μm肌性动脉WT%显著高于BST组与对照组(P0.01)，BST组50～100μm肌性动脉WT%显著高于对照组(P0.01)。对照组101～150μm肌性动脉WA%显著高于BST组与对照组(P0.01)，BST组101～150μm肌性动脉WA%高于对照组(P0.05)；50～100μm肌性动脉WA%结果与101～150μm肌性动脉WA%结果相同。 7肺动脉病理形态改变光镜下肺动脉HE染色可见对照组肺动脉管壁薄，内膜光滑，内皮细胞扁平。PAH组大鼠肺动脉内膜及中膜肥厚，平滑肌细胞增殖，排列紊乱，管腔狭窄，同时伴有炎性细胞浸润，而BST治疗后能够明显改善上述肺动脉病理形态改变。结论： 1血浆ET-1水平升高和ETA、ETB受体表达失平衡在左向右分流肺动脉高压肺血管重构中起着重要的作用。 2ETA/B受体拮抗剂波生坦通过拮抗ET-1血管收缩作用，同时改善ETA和ETB受体表达失平衡，从而改善左向右分流肺动脉高压大鼠肺血管重构。
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【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R96;R-332

【参考文献】