去乙酰化酶抑制剂TSA通过激活ERK和p38抑制间充质干细胞成脂分化

发布时间：2019-04-10 07:07

【摘要】：本文研究了丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPKs)信号通路在组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)曲古抑菌素A(trichostatin A,TSA)抑制间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)C3H10T1/2成脂分化中的调节机制.首先利用MTT法检测TSA对其增殖活性的影响;Western印迹法首先检测MAPKs信号通路中pERK和p-p38蛋白在间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化过程中的表达情况,以及不同浓度、不同时间TSA处理对pERK和p-p38蛋白差异变化情况;其次再用Western印迹检测TSA对成脂分化过程中间充质干细胞pERK和p-p38蛋白表达的影响.MTT结果显示,TSA浓度在1 nmol/L～100 nmol/L范围内抑制C3H10T1/2细胞的增殖活性,且TSA浓度约为60 nmol/L时即抑制一半以上的C3H10T1/2细胞增殖活性.Western印迹结果显示,TSA处理5 min～80 min,及浓度在1 nmol/L～100 nmol/L范围内激活MAPK信号通路中pERK和p-p38蛋白的表达;C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,胞内pERK和p-p38蛋白的表达呈现下调趋势;而TSA抑制了成脂分化过程中C3H10T1/2细胞内pERK和p-p38蛋白的表达变化.本研究结果提示,在C3H10T1/2细胞成脂分化过程中,MAPK信号途径分子pERK和p-p38表达下调;TSA可能是通过活化pERK和p-p38进而抑制间充质干细胞C3H10T1/2成脂分化.
[Abstract]:In this study, we studied the inhibitory effect of mitogen-activated protein kinase (mitogen activated protein kinases,MAPKs) signaling pathway on (mesenchymal stem cells, of mesenchymal stem cells by histone deacetylase inhibitor (histone deacetylase inhibitors,HDACis (A (trichostatin A, TSA). The regulatory mechanism of MSCs) C3H10T1/2 in adipogenic differentiation. Firstly, MTT method was used to detect the effect of TSA on its proliferative activity. Western blot was used to detect the expression of pERK and p-p38 proteins in MAPKs signaling pathway during adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells (C3H10T1/2), and the difference of pERK and p-p38 proteins treated with TSA at different concentration and time. Secondly, the effect of TSA on the expression of pERK and p-p38 protein in mesenchymal stem cells during adipogenic differentiation was detected by Western blot. The results showed that the concentration of TSA inhibited the proliferation of C3H10T1/2 cells in the range of 1 nmol/L~100 nmol/L. When the concentration of TSA was about 60 nmol/L, the proliferation activity of C3H10T1/2 cells was inhibited by more than half. Western blot results showed that TSA treated 5 min~80 min,. And the expression of pERK and p-p38 proteins in the MAPK signaling pathway was activated in the range of 1 nmol/L~100 nmol/L. The expression of pERK and p-p38 proteins in C3H10T1/2 cells was down-regulated during adipogenic differentiation, while TSA inhibited the expression of pERK and p-p38 proteins in C3H10T1/2 cells during adipogenic differentiation. These results suggest that the expression of MAPK signal pathway molecules pERK and p-p38 is down-regulated in the process of adipogenic differentiation of C3H10T1/2 cells, and TSA may inhibit the adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells C3H10T1/2 by activating pERK and p-p38.
【作者单位】： 暨南大学生命科学技术学院组织移植与免疫实验中心;
【基金】：国家自然科学基金项目(No.30600587,No.30900563,No.81071483) 中央高校基本科研业务费专项资金项目 江苏省教育厅自然科学基金项目(No.10KJB180006)~~
【分类号】：R329

【共引文献】

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本文编号：2455592