河西走廊地域流行幽门螺杆菌菌库建立、耐药状况及重要毒力基因分型研究

发布时间：2019-06-20 23:03

【摘要】：目的： 1.从河西走廊地域上消化道疾病患者体内分离鉴定幽门螺杆菌(Helicobacter Pylori, Hp),建立胃癌高发区区域性Hp菌库。为进一步研究Hp生物学特性、致病性和致病机制、研制有效疫苗打下基础。 2.调查河西走廊地域流行Hp菌株对常用抗菌药物(阿莫西林、克林霉素、左氧氟沙星、甲硝唑、呋哺唑酮、四环素)的耐药状况,为当地Hp根除提供依据。 3.调查河西走廊地域流行Hp重要毒力基因vacA和cagA基因型,分析不同基因型Hp感染与河西走廊上消化道疾病发生的关系。方法： 1.收集武威、金昌、张掖三地医院314例上消化道疾病患者胃粘膜标本,经微需氧分离培养,观察培养特性、形态学、快速尿素酶、氧化酶、触酶及ureh.PCR扩增,鉴定Hp。收集相关信息,统一编号,-80℃冻存,建立河西走廊地域流行Hp菌库。 2.应用Hp菌库,采用Kirby-Bauer纸片法检测71株河西走廊地域流行Hp菌株对阿莫西林、克拉霉素、左氧氟沙星、甲硝唑、呋哺唑酮、四环素的耐药状况。比较不同性别、年龄段、病理类型患者Hp菌株的耐药差异。 3.应用Hp菌库,提取70株Hp基因组DNA。 PCR扩增Hp vacA基因s区(sla,slb,slc,s2)和m区(ml和m2)以及cagA。分析不同的vacA和cagA基因型与临床病理特征、年龄、性别以及地域的关系。结果： 1.从314例上消化道疾病患者中分离到Hp81株,阳性率为25.80%。不同性别患者间Hp阳性率差异无统计学意义(χ2=0.427,P0.05)。不同病理类型患者间Hp阳性率差异有统计学意义(χ=7.705,P0.05)。其中消化性溃疡组(46.43%)显著高于慢性胃炎组(23.32%)(P0.05)。不同年龄段患者间Hp阳性率差异有统计学意义(χ2=13.974,P0.05),其中15-30岁年龄组人群Hp分离阳性率显著高于61岁以上年龄组。液氮保存组胃黏膜标本Hp分离阳性率显著高于-20℃保存组(χ2=5.368,P0.05)。-80℃冻存菌株,成功建立河西走廊地域流行Hp菌库。 2.71株Hp对常用6种抗菌药物的耐药性依次为：甲硝唑(47.89%),左氧氟沙星(8.45%),阿莫西林(4.23%),四环素(2.82%),克拉霉素(1.41%),呋哺唑酮(0%)。Hp对不同抗菌药物的耐药率在不同性别、不同年龄段间均无显著性差异(P0.05)。分离自慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌患者菌株对左氧氟沙星的耐药率分别为3.85%(2/52)、9.09%(1/11)和37.50%(3/8),差异有统计学意义(P0.05),其中胃癌组分离Hp对左氧氟沙星的耐药率高于慢性胃炎组(P0.05),对其它抗菌药物的耐药状况均无显著性差异(P0.05)。 3.70株Hp检出vacA阳性率为100%, cagA阳性率为97.14%(68/70)。sla单阳性菌株40株,阳性率57.14%(40/70)；s1c单阳性菌株11株,阳性率15.71%(11/70),sla和s1c阳性混合感染菌株19株,阳性率27.14%(19/70)。检出m2阳性菌株37株,阳性率为52.86%,未检出ml亚型。vacAsla型以及sla/m2型Hp在不同病理类型、年龄段和地区患者中的感染率高于其它基因型Hp。结论： 1.Hp感染在河西走廊地域消化性溃疡的发生和发展中起重要作用。 2.在转运培养基中加入甘油,通过液氮保存和运送可提高远距离、采集后放置时间较长胃粘膜标本中Hp的分离率。 3.河西地域流行Hp菌库的建立,将为进一步研究Hp致病机制、遗传进化、疫苗研制等打下基础。 4.河西走廊地域流行Hp对甲硝唑耐药率较高,在一线根除方案中应尽量避免使用；呋哺唑酮、阿莫西林等应作为根除的主要药物。 5.河西走廊地域流行菌株主要为vacA和cagA双阳性,致病性强的Ⅰ型菌株；这可能是河西走廊地域消化性溃疡、胃癌高发的原因之一。流行菌株中vacA基因型以sla/m2为主,其次为slc/m2。 vac Am区可能存在较大变异。
[Abstract]:Purpose: 1. Isolation and identification of Helicobacter pylori (Hp) from patients with upper gastrointestinal diseases in Hexi Corridor, and to establish regional Hp (Hp) bacteria in high-hair region of gastric cancer Library. To further study the biological characteristics, pathogenicity and pathogenesis of Hp, and to develop an effective vaccine. 2. To investigate the drug-resistant status of the Hp strains in the regional epidemic of Hexi Corridor to the common antibacterial drugs (amoxicillin, clindamycin, levofloxacin, sodium nitrogenide, and chlortetracycline, tetracycline), and to eliminate the Hp eradication in the local area. Objective:3. To investigate the major virulence gene vacA and cagA genotype in the region of Hexi Corridor, and to analyze the different genotypes of Hp infection and upper gastrointestinal diseases in the Hexi Corridor. occurring Methods:1. The gastric mucosa specimens of 314 patients with upper digestive tract diseases were collected from the three hospitals in Wuwei, Jinchang and Zhangye. The culture characteristics, morphology, rapid urease, oxidase, enzyme and ureh were observed by microaerobic separation culture. Information, uniform number,-80 鈩，

本文编号：2503584