中和抗体阻断FcγR Ⅰ降低脂多糖诱导的大鼠PC12细胞凋亡

发布时间：2019-07-23 12:41

【摘要】：目的探讨IgG Fc受体Ⅰ(FcγRⅠ)在脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞凋亡中的作用。方法将PC12细胞接种于培养板中,用(50、125、250、500、1000)μg/mL LPS处理24 h,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,选取合适的LPS剂量。待细胞处于对数生长期,采用随机数字表法分为空白对照组:不进行任何处理,继续培养24 h;LPS组:培养液中加入500μg/mL LPS,孵育24 h;LPS联合FcγRⅠ中和抗体组:培养液中加入500μg/mL LPS和0.2μg/mL FcγRⅠ中和抗体,孵育24 h。处理结束后,实时荧光定量PCR和Western blot法检测各组FcγRⅠmRNA和蛋白含量,异硫氰酸荧光素标记的膜联素Ⅴ/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)染色结合流式细胞术检测细胞凋亡,采用免疫组织化学染色法检测各组细胞caspase-3、Bcl-2和BAX的蛋白水平。结果随着LPS剂量的增加,PC12细胞的活力逐渐下降;与对照组相比,LPS处理组FcγRⅠmRNA和蛋白水平增加,caspase-3、Bcl-2和BAX蛋白水平增加,细胞凋亡率增加;与LPS组相比,LPS联合FcγRⅠ中和抗体组FcγRⅠmRNA和蛋白水平降低,caspase-3、BAX蛋白水平显著降低,细胞凋亡率降低,Bcl-2蛋白水平增加。结论FcγRⅠ参与LPS诱导的PC12细胞凋亡。
[Abstract]:Objective to investigate the role of IgG Fc receptor 鈪，

本文编号：2518158