人源抗EV71病毒中和表位SP70的Fab抗体研制
[Abstract]:Objective to construct a human anti-EV71 virus Fab bacteriophage antibody library and screen human monoclonal antibodies with neutralizing activity, so as to lay a foundation for clinical diagnosis and treatment of hand, foot and mouth disease caused by EV71 infection. Methods Peripheral lymphocytes were isolated from anticoagulant blood of adult volunteers, total RNA was extracted and reverse transcribed into cDNA.. Using cDNA as template, light chain and heavy chain Fd region genes were amplified by human IgG Fab fragment primers and cloned into pComb3 vector step by step to construct Fab bacteriophage antibody library. Fab bacteriophage antibody library was enriched and screened with SP70 as antigen. the recombinant bacteriophage was infected with XL1-Blue strain and induced to express, and the supernatant of the expressed strain was screened by SP70. Results three clones of light and heavy chain gene combination sequences were obtained, and the three Fab antibodies could specifically bind to SP70 peptides. Conclusion Human anti-EV71 virus Fab bacteriophage antibody library was successfully constructed, and three specific human Fab antibodies against EV71 virus structural protein VP1 neutralizing linear epitope SP70 were screened out, which laid a foundation for the development of a new diagnostic and therapeutic tool for hand, foot and mouth disease.
【作者单位】： 福建省厦门市湖里区疾病预防控制中心;福建医科大学公共卫生学院;福建省疾病预防控制中心;
【基金】：国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2011AA02A114) 福建省自然科学基金(No.2010J01115)联合资助~~
【分类号】：R392
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，本文编号：2518286
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