内毒素血症小鼠肺组织中miRNAs的表达变化及功能的初步研究

发布时间：2019-11-03 16:19

【摘要】：目的 检测内毒素血症小鼠肺组织中miRNAs的表达情况,初步探讨miRNAs在内毒素血症肺损伤中可能的作用。 方法 1.经腹腔注射大肠杆菌内毒素(8mg/kg)制备小鼠急性肺损伤模型,采用高通量miRNA芯片技术初步筛选出内毒素血症肺组织中差异表达的miRNAs。 2.应用QRT-PCR技术检测经miRNA芯片初步筛选出的部分差异表达的miRNAs,以验证其表达是否和芯片结果一致。 3.挑选出QRT-PCR验证结果与芯片结果一致的miR-1949,研究不同时间及不同剂量LPS处理后RAW264.7细胞中miR-1949的表达情况。 4.应用miRNA靶基因预测软件miRDB预测miR-1949的靶基因,从中选择几个靶基因,然后分别在组织及细胞水平检测LPS处理后这些靶基因的表达情况。 结果 1.经miRNA芯片检测发现,内毒素血症小鼠肺组织中共有17个miRNAs表达上调,9个miRNAs表达下调。 2.经QRT-PCR验证,miR-1949、miR-223、miR-150表达与芯片结果一致,其中miR-1949、miR-223表达上调,miR-150表达下调。 3.LPS处理后RAW264.7细胞中miR-1949的表达呈现时间及剂量依赖效应。 4.对预测出的miR-1949的靶基因MAPK8、MAP2K1、SMEK1进行检测,发现LPS处理后肺组织及RAW264.7细胞中SMEK1表达降低,MAPK8、MAP2K1没有明显改变。 结论 1.miR-1949在LPS处理后的小鼠肺组织及RAW264.7细胞中表达上调； 2.miR-1949可能通过调控SMEK1的表达而在小鼠内毒素血症肺损伤中发挥作用。
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R363

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本文编号：2555167