二苯乙烯苷对LPC诱导血管内皮细胞损伤的保护作用的研究

发布时间：2020-02-21 08:54

【摘要】：目的 观察在溶血性磷脂酰胆碱(Lysophosphatidylcholine,LPC)诱导下,二苯乙烯苷(2,3,5,4′-Tetrahydroxysilbene-2 -O-β-D-glucopyranoside TSG)对血管内皮细胞(Vein Endothelial Cell,VEC)损伤的保护作用,并对其作用机制进行的研究。 方法 培养人脐静脉血管内皮细胞(Human Umbilical Vein Endothelial Cell,HUVEC)株,经传代,于第3-4代用于实验。随机将细胞分为:空白对照;模型组;实验组。首先将LPC以10ug/ml作用于HUVEC,并与细胞一起孵育24小时诱导内皮细胞损伤,建立细胞损伤的模型;将TSG以10.0; 1.0; 0.1μmol/l预先作用于HUVEC 1小时后,再给予10μg/ml的LPC作用于HUVEC共同孵育24小时,建立实验组;同时,设立不加药物的空白对照组。然后,收集细胞上清液测定其丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和非对称性二甲基精氨酸(ADMA)含量;收集细胞,测定其中的活性氧(ROS)水平、细胞的凋亡率和存活率。用硝酸还原酶法检测细胞上清液中的NO的浓度;用硫代巴比妥法检测细胞上清液中MDA的含量;生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞上清液中ADMA含量;荧光显微镜观察细胞内ROS水平、Annexin V-FITC/PI荧光双染色法流式细胞仪测定其细胞的凋亡率、MTT法检测细胞的存活率。 结果 1.与空白对照组比较结果显示,用LPC(10μg/ml)作用于HUVEC24小时后,观测到细胞培养上清液中MDA含量(P0.05),ADMA含量(P0.05)及细胞内ROS水平(P0.05)都显著性增加,而细胞培养上清液中NO含量明显降低(P0.05),细胞的凋亡有所增加(P0.05),致使细胞的存活率降低(P0.05)。 2.与LPC损伤组比较中,可以看到,以10.0, 1.0, 0.1 umol/1浓度的TSG作用HUVEC 1小时后,再予以终浓度为10μg/ml的LPC作用HUVEC一起孵育24小时后,显示:其均能使细胞培养上清液中MDA含量(P0.05)、ADMA含量(P0.05)及细胞内ROS水平(P0.05)显著性降低,而细胞上清液中的NO含量显著性升高(P0.05),出现了细胞的凋亡率降低(P0.05)和细胞的存活率(P0.05)显著性升高的现象。 结论 1.二苯乙烯苷能够抑制血管内皮细胞的凋亡,而对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用。 2.二苯乙烯苷对LPC诱导血管内皮细胞损伤的保护作用与其抗氧化、升高NO浓度、降低ADMA水平有关。
【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R363

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