生长抑素和神经肽Y在癫痫模型大鼠海马和颞叶皮质部位的异常变化研究

发布时间：2020-04-06 07:20

【摘要】：目的:癫痫与中枢神经系统兴奋性递质和抑制性递质的平衡失调密切相关。生长抑素(Somatostatin,SST)和神经肽Y(Neuropeptide Y,NPY)是内源性多肽,是中枢神经系统重要的神经递质,在哺乳动物的中枢神经系统分布广泛。癫痫模型大鼠(Epileptic rat model,TRM)是一种遗传性癫痫动物模型,可在无任何外界刺激下引发癫痫。本研究检测了TRM的大脑中海马、颞叶皮质和小脑部位SST和NPY的表达分布。探讨SST和NPY的表达与TRM的相关性,阐明癫痫发病相关的分子机制,为癫痫的治疗提供理论依据。方法:实验动物采用14只TRM和14只对照组Wistar大鼠,取出各组大鼠海马、颞叶皮质和小脑3个部位。使用Trizol试剂提取各部位的总RNA,并用Real time-PCR法检测各组间SST和NPY的mRNA表达水平变化。进一步采用免疫组化方法检测各组大鼠海马Ca3区、海马hilus区、颞叶皮质和小脑部位SST和NPY蛋白表达水平的变化。结果:Real time-PCR结果显示,与正常对照组Wistar大鼠相比,TRM海马和颞叶皮质SST和NPY的mRNA表达均上调,具有显著性差异(p0.05)。免疫组化结果也证实TRM的海马Ca3区、hilus区和颞叶部位SST和NPY的表达增加,具有显著性差异(p0.05)。Real time-PCR和免疫组化证明,与对照组相比TRM组小脑部位的SST和NPY无论是mRNA水平还是蛋白表达水平均无显著性差异(p0.05)。结论:综上所述,与正常对照组Wistar大鼠相比,TRM组海马和颞叶皮质SST和NPY的mRNA水平和多肽合成水平均显著上调。而与对照组相比,TRM组小脑部位的SST和NPY无显著性差异。进一步分析认为,在TRM组海马Ca3区和hilus区,NPY和SST的表达增加,这可能是机体内源性神经系统自发激活的反馈作用,是机体的一种适应性反应,以减轻或防止癫痫发作神经元损伤。SST和NPY作为一种内源性的抗癫痫药物,在癫痫发病和治疗中起着重要作用。外源给予SST和NPY或用基因治疗方法过表达SST和NPY是癫痫病治疗的新思路。
【图文】：

电泳,条带,阳性对照,癫痫

均以平均值加减标准差表示。各组间比较采用 t 检验，，统设定为 0.05。所有统计分析均使用 SPSS 软件 19.0 版本。3 结果鼠基因鉴定认由实验室自行繁殖并饲养至 4 周龄时 TRM 种鼠中真正具过 PCR 方法特异性扩增癫痫基因来鉴定。如图所示，CO因的正常大鼠，条带无明显表达；CON2 为具有癫痫基因的阳性对照，有两条条带。TRM1 至 TRM4 为 4 只癫痫基源的电泳条带与阳性对照 CON2 表达条带相同，可确定其为鼠。取用该鼠鼠脑进行 RT-PCR 及免疫组化等后续一系列

颞叶皮质,海马,对照组,大鼠

中国医科大学硕士学位论文3.2 Real time-PCR 检测两种信号肽的相对表达量采用 RT-PCR 方法测量 TRM 和对照组大鼠的大脑区域 SST 和 NPY 的水平。如图 2 所示，TRM 与对照组相比，海马和颞叶皮质 SST 和 NPY 的表达均升高，具有显著性差异（p<0.05），结果见表 2。然而，在 TRM 的小中两种神经肽的表达无显著性差异（p>0.05），如图 2 所示。
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R742.1;R-332

【参考文献】