hAMSCs培养上清液对痤疮大鼠炎症模型TNF-α和MMP-2蛋白表达的影响

发布时间：2020-04-27 11:39

【摘要】：目的:以痤疮大鼠炎症模型为实验对象,观察大鼠耳廓组织大体观改变、组织病理表现以及TNF-α、MMP-2蛋白表达情况,探讨h AMSCs培养上清液对痤疮大鼠炎症模型的影响。方法:选取SD大鼠,雌性,体重(250±30)g,共49只,随机分为A、B、C、D、E、F、G七组,每组7只,A组为正常空白对照组、B组为生理盐水注射组、C组为痤疮模型组、D组为痤疮模型未治疗组、E组为痤疮模型异维A酸红霉素凝胶涂擦治疗组、F组为痤疮模型h AMSC培养上清液涂擦治疗组、G组为痤疮模型h AMSC培养上清液注射治疗组。A组不予特殊处理,7天后处死;B组给予无菌生理盐水50μl,大鼠双侧耳廓中央皮下注射,共1次,7天后处死。C、D、E、F、G组均给予痤疮丙酸杆菌混悬液50μl,大鼠双侧耳廓中央皮下注射,共1次,建立痤疮模型。C组于建模7天后处死;D组建模7天后继续观察4周后处死;E组建模7天后给予局部涂擦异维A酸红霉素凝胶,每天1次,共4周后处死;F组建模7天后局部涂擦h AMSCs培养上清液,方法同E组;G组建模7天后给予局部注射h AMSCs培养上清液,每周2次,共4周后处死。建模2天后用无菌针头挑取耳廓肿胀部位组织接种于血平板,厌氧罐中培养48小时,肉眼观察菌落形态;无菌针头挑取菌落,涂片,光学显微镜下观察细菌形态。实验期间,7组动物均正常饲养,每天观察大鼠耳廓组织大体观改变;各组大鼠在实验结束后,处死,取大鼠耳廓组织行HE染色观察耳廓组织病理改变;免疫组织化学方法检测各组耳廓组织TNF-α、MMP-2蛋白表达情况。结果:1、微生物学检查:建模后用无菌针头挑取耳廓肿胀部位组织微生物学检查证实为痤疮丙酸杆菌感染。2、造模结果判断:1)肉眼观察结果:A组耳廓无变化;B组于注射当时形成肿胀,24小时后肿胀消退;C组大鼠耳廓局部皮肤肿胀,可见丘疹。2)组织病理观察结果:A、B组未见明显炎症细胞浸润;C组表皮角化过度,部分毛囊口扩张,面积增大,毛囊皮脂腺周围及真皮内炎症细胞弥漫性浸润,各层分界不清。3)TNF-α和MMP-2免疫组织化学观察结果:A、B组可见弱阳性蛋白表达;C组可见蛋白呈强阳性表达;C组与A、B组比较蛋白阳性表达上调,差异有统计学意义(P0.05)。3、痤疮模型未治疗组与治疗组结果判断:1)肉眼观察结果:D组大鼠耳廓丘疹明显增多增大;E、F、G组耳廓丘疹基本消退。2)组织病理观察结果:D组结果基本同C组;E、F、G组毛囊口面积缩小,真皮及毛囊皮脂腺周围可见少量炎症细胞浸润。3)TNF-α和MMP-2免疫组织化学观察结果:D组与C组比较大鼠耳廓组织中阳性蛋白表达无明显增减,差异无统计学意义(P0.05);E、F、G组与C、D组比较阳性蛋白表达下调,差异有统计学意义(P0.05);E、F、G组与A、B组比较阳性蛋白表达无明显增减,差异无统计学意义(P0.05);E、F、G组组间比较阳性蛋白表达无明显差异,差异无统计学意义(P0.05)。结论:1.h AMSCs培养上清液干预可减轻大鼠耳廓炎症反应,其机制可能是通过上清液中IL-10、TIMP来抑制TNF-α、MMP-2的表达,从而减轻炎症反应。2.h AMSCs培养上清液涂擦治疗组与注射治疗组无明显疗效差异。
【图文】：

图 1：a 琼脂表面可见针尖至粟粒大小半球形白色菌落生长。b 镜下表现呈革兰弱阳性分节状的粗大杆菌。.2 造模结果判断．2．1 肉眼观察结果（图2）。A组 双侧耳廓无变化；B组于注射当时形成肿胀，24小时后肿胀消退廓增厚，质地较硬，表面粗糙，可见散在丘疹。

乱的粗大杆菌。2.2 造模结果判断2．2．1 肉眼观察结果（图2）。A组 双侧耳廓无变化；B组于注射当时形成肿胀，，24小时后肿胀消退；C组耳廓增厚，质地较硬，表面粗糙，可见散在丘疹。A B
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R758.733;R-332

【参考文献】

相关期刊论文 前10条

1 李峥;刘厚广;霍姗姗;;液氮冷冻联合曲安奈德、氟尿嘧啶皮损内注射治疗瘢痕疙瘩疗效分析[J];齐齐哈尔医学院学报;2015年32期

2 杨萍;;冷冻后注射曲安奈德治疗瘢痕疙瘩的临床观察[J];浙江创伤外科;2015年04期

3 王晶;;点阵激光治疗35例痤疮瘢痕疗效观察[J];湖北科技学院学报(医学版);2015年02期

4 陈晓莉;蒋艳;王鸿健;高仕权;;二氧化碳点阵激光联合硅凝胶瘢痕贴片治疗面部痤疮瘢痕疗效观察[J];中国美容医学;2015年06期

5 孔德平;陈凯;;5-氟尿嘧啶对增生性瘢痕的作用研究[J];重庆医学;2015年08期

6 付晓丹;骆肖群;;复方口服避孕药在痤疮治疗中的应用[J];中国皮肤性病学杂志;2015年04期

7 李战;农晓琳;李佳荃;朴智;唐黎黎;;青蒿琥酯对增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用及机制探讨[J];中国药理学通报;2014年07期

8 陈强;蔡景龙;宗宪磊;何永强;周振山;;皮肤扩张术联合术后早期电子线放疗治疗下颌角痤疮后瘢痕疙瘩[J];实用皮肤病学杂志;2014年03期

9 张泠;罗惠兰;刘兴德;;正加速度暴露对冠状动脉狭窄小型猪模型TNF-α和ICAM-1表达的影响[J];解放军医学杂志;2014年06期

10 张凤仙;;消痤散倒膜治疗寻常痤疮的临床观察和实验研究[J];湖北中医杂志;2014年04期

相关博士学位论文 前2条

1 王鹏;TGF-β1介导TGF-β1/Smad及ERK/MAPK通路协同促进大鼠骨髓炎瘢痕形成的机制研究[D];山东大学;2017年

2 房锋俊;骨髓间充质干细胞对增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞生物学行为影响的研究[D];山东大学;2016年

相关硕士学位论文 前7条

1 董轩;IL-1β-siRNA联合骨髓间充质干细胞治疗类风湿性关节炎的实验研究[D];扬州大学;2017年

2 张丽;Hippo信号通路在病理性瘢痕发生机制中作用研究[D];扬州大学;2017年

3 李晓娟;白介素-1β（IL-1β）、白介素-18（IL-18）及NOD样受体蛋白3（NLRP3）在痤疮发病过程中作用的研究[D];西南医科大学;2017年

4 刘茹太洋;病理性瘢痕的发病机制及治疗进展[D];北京协和医学院;2017年

5 卞新海;点阵CO_2激光和积雪苷对兔耳瘢痕模型中TGF-β1、VEGF因子影响的研究[D];南京中医药大学;2016年

6 张璐;痤疮丙酸杆菌刺激人真皮成纤维细胞后基质金属蛋白酶-2表达的研究[D];四川医科大学;2015年

7 彭琴;点阵CO_2激光联合积雪苷霜治疗痤疮后增生性瘢痕的疗效观察[D];南京中医药大学;2014年

本文编号：2642217