GPR120受体在巨噬细胞功能调节中的作用

发布时间：2020-05-26 00:33

【摘要】：目的:本实验旨在研究长链脂肪酸受体(GPR120)对表达于巨噬细胞(MΦ)炎性细胞因子表达以及吞噬功能的影响并探讨可能的信号机制。方法:1.8-10周Balb/c小鼠应用RT-PCR对腹腔和肺GPR120和炎性细胞因子的表达水平进行了检测,并对GPR120与细胞因子表达的相关性进行分析。2.培养12小时Balb/c小鼠肺泡MΦ分对照组、TUG-891(GPR120选择性激动剂)处理组加入粒径1.0um荧光微球(红色荧光),待两组细胞吞噬4小时后,流式细胞仪对两组细胞吞噬情况进行检测分析。3.培养12小时Balb/c小鼠肺泡MΦ分对照组和TUG-891组FLOU3钙染料对肺泡MΦ胞内钙染料染色,细胞置于活细胞工作站内,运用激光共聚焦显微镜分别对对照组和TUG-891组肺泡MΦ荧光强度进行记录,对细胞内钙的变化进行了测量和分析。结果:1.观察到两组MΦ内都有GPR120表达,但肺泡MΦ的GPR120表达水平显著高于腹腔MΦ(t=9.712,P㩳0.01)。IL-1(t=7.771,P㩳0.01).和TNF-α(t=5.993,P㩳0.01)的表达水平在肺泡MΦ也显著高于腹腔MΦ,IL-10(t=6.009,P㩳0.01.)和IL-6(t=7.027,P㩳0.01.)的表达水平在肺泡MΦ显著低于腹腔MΦ。腹腔GPR120表达水平与IL-10(R=0.928)、IL-6(R=0.95)、TNF-α(R=0.93)呈正相关,与IL-1负相关(R=-0.914,)。肺MΦ的GPR120表达水平与IL-1(R=0.911)、IL-6(R=0.76)、TNF-α(R=0.836)呈正相关,与IL-10负相关(R=-0.955)。2.与对照组相比,激动剂组肺泡MΦ吞噬荧光微球的能力明显减弱(P㩳0.01)。3.相较于对照组,激动剂在肺泡MΦ内会引起了一过性胞内钙增高(P㩳0.05)。结论:GPR120受体在巨噬细胞上表达,其在巨噬细胞功能调节中的作用主要表现为抑制炎症相关因子的表达并且抑制吞噬,细胞内钙变换可能参与其胞内部信号转导过程。
【图文】：

信号通路,功能研究,信号,激动剂

功能研究方面两种重要的工具，据此对比我们认为 TUG-891 是现有的激理想的一种，在实验中选择了 TUG-891 作为 GPR120 特异性激动剂。这现和阐明，为 GPR120 的功能研究提供了有力手段，也是本实验选择 TU特异性激动剂的依据。四.GPR120 的功能及胞内信号机制:关于 GPR120 对细胞功能的影响主要集中在以下方面：在味蕾细胞的主要功能与饮食脂肪的味觉信号转导作用有关，有报道人和啮齿类动物中可能参与脂肪酸味觉转导[26,27]，进而影响人和啮齿动物的食物选择，另外调节胃肠肽类激素、胆囊收缩素（CCK）分泌、葡萄糖依赖性促胰岛素分泌分泌、肠促胰岛素激素（GLP）分泌、在脂肪形成和影响细胞增殖方面等实验结果所涉及的细胞内部信号转到通路各不相同，，有研究已报道 GPR12转导通路图[28]，见图 1

腹腔,肺泡

所收集细胞呈阳性染色（图2A、B）。收集的腹腔与肺泡 MΦ均呈圆形，腹腔 MΦ平均面积为 82.6±9.4μm2，而肺泡 MΦ平均面积为 121.8±17.8μm2,二者具有明显差异。流式分析表明所收集腹腔细胞和肺泡细胞的 CD68 阳性比例分别为 94%±5%和 97%±3%，表明所收集的腹腔与肺泡细胞为高纯度 MΦ（图 2C、D）。具体结果如图 2 所示。图 2 腹腔和肺泡 MΦ的鉴定分析A：腹腔 MΦ的 CD68 染色；B：肺泡 MΦ的 CD68 染色；C：免疫染色的阴性对照；D：腹腔 MΦ
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R329.2

【参考文献】