组蛋白赖氨酸甲基转移酶Ezh1促进TLR触发天然免疫应答及其机制研究

发布时间：2020-06-05 12:47

【摘要】：组蛋白的甲基化在调节基因表达方面发挥着重要的作用,而组蛋白甲基化修饰的研究在免疫学领域的研究才刚刚开始。为了寻找在天然免疫中可能发挥作用的表观遗传修饰酶,我们通过对小鼠骨髓来源的树突状细胞的转录组数据进行分析,发现Ezhl在成熟的树突状细胞中有特异性的表达,于是我们认为Ezhl可能在树突状细胞功能的调控中发挥作用。 为了研究Ezhl的功能,我们使用了siRNA干扰了小鼠骨髓来源的树突状细胞中Ezhl的表达,我们发现在Ezhl干扰后的细胞在使用LPS和PGN刺激后所分泌的炎性因子如白细胞介素-6,肿瘤坏死因子和一型干扰素的水平有了显著的降低。同样我们使用siRNA干扰小鼠的腹腔巨噬细胞后,其在LPS和PGN刺激后分泌的细胞因子水平也有所降低。Ezh1干扰后的树突状细胞在LPS刺激后的MHCⅡ和共刺激分子的表达有所降低,导致其无法有效地诱导T细胞的应答。在接下来的实验中,我们需要验证是否Ezhl对天然免疫的调控依赖于其及甲基化转移酶的活性,我们通过在巨噬细胞中过表达酶活性区域缺失的Ezhl的实验进一步证明了Ezhl对TLR活化的调控是和其组蛋白赖氨酸甲基化转移酶活性相关的。随后通过分析信号通路的活化水平,我们发现在LPS刺激下,Ezhl干扰的巨噬细胞中TLR活化所诱导的信号通路的活化有所下降,NF-κb和IRF-3信号通路的中信号接头分子和转录因子的磷酸化有所下降。这种下降可通过过表达全长的Ezhl逆转,但过表达酶活性缺失的Ezhl则没有效果。 Ezh1是一个组蛋白赖氨酸甲基化转移酶,根据以前的报道其可通过对基因位点H3K27三甲基化的修饰抑制蛋白的表达,我们猜想Ezh1可能通过沉默某些TLR通路的负调控分子基因的表达,维持其信号通路的畅通。通过对干扰Ezh1后的巨噬细胞的转录组数据的分析和验证,我们发现,Ezh1抑制TLR通路的负向调控蛋白Tollip的表达,而这种抑制依赖于Ezh1分子的甲基转移酶活性。最后,我们通过染色体免疫共沉淀实验证明了Tollip转录起始位点近端的H3K27三甲基化水平受到Ezh1的调控,并且Ezh1靶向与染色体的调节位点结合。 综上所述,本研究结果提示,组蛋白赖氨酸甲基转移酶Ezh1抑制TLR通路的免疫负向调控分子Tollip的表达,继而促进了TLR通路活化诱导的细胞因子的产生。
【图文】：

Medium LPS CpG P(%《I:C》PGN图3.1TLR配体刺激促进Ezhl在树突状细胞中的表达Figure 3.1 Upregulation of Ezhl expression in dendritic cells by TLR ligands

主要结论(1)在LPS等TLR配体刺激的小鼠树突状细胞和腹腔巨瘦细胞中，，组蛋白赖l#酸甲基转移醇Ezhl表徸显著增加；(2) Ezhl促进TLR所诱导的细胞因子的表达并促进TLR信号通路的活化；(3) Ezhl通过促进TLR活化所诱导树突状细胞MHCn和共刺激分子的表达促进T细胞免疫；(4) Ezhl促进TLR诱导的细胞因子产生和促进TLR信号通路活化依赖于其组蛋白赖氨酸甲基转移酶活性；(5) Ezhl通过抑制TLR信号通路负向调控分子ToUip分子转录从而促进TLR信号通路的活化(6) Ezhl通过组蛋白H3ia7的三甲基化而抑制Tbllip分子的表达
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R392

【共引文献】

相关期刊论文 前10条

1 陈大帅;周思远;唐宏智;李瑛;;针刺调节核转录因子-κB信号通路的实验研究进展[J];中华中医药杂志;2013年10期

2 曹文波;莫赛军;柯少瑞;张宏波;杨胜利;;钙结合蛋白S100A8和S100A9在慢性炎症相关肿瘤发生中的调控作用[J];癌变.畸变.突变;2013年05期

3 谭晓华;;树突状细胞的发育生物学[J];发育医学电子杂志;2013年02期

4 曾雪燕;王光明;李艳;潘云;刘蜻蜻;;核受体结合域蛋白2的研究进展[J];广东医学;2013年19期

5 王彩红;黄继昌;刘勇;吴风瑞;丁彪;王荣;张远;李文雍;;小鼠孤雌胚与体内正常胚H3K27三甲基化模式的差异[J];动物学杂志;2014年01期

6 鲍斌;林燕;薛薏;;小鼠p300-HAT真核表达质粒的构建[J];安徽农业科学;2013年27期

7 王济;李玲孺;李英帅;张惠敏;郑燕飞;陈雪梅;杨寅;张妍;王琦;;树突状细胞成熟及其表观遗传调节理论在中医特禀体质(过敏体质)研究中的应用[J];中华中医药杂志;2014年03期

8 Ling Zhang;Cheng-Cai Wang;;Inflammatory response of macrophages in infection[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2014年02期

9 张义;谢海龙;李龙;田夫;;DC-CIK抗消化道肿瘤的研究进展[J];长江大学学报(自科版);2014年12期

10 郭有;高艳芳;胡恭华;;肝细胞癌表观遗传发病机制的研究进展[J];重庆医学;2014年16期

相关会议论文 前6条

1 Xin Li;Qing Huang;Choon-Nam Ong;Xing-Fen Yang;Han-Ming Shen;;Chrysin sensitizes tumor necrosis factor-α-induced apoptosis in human tumor cells via suppression of nuclear factor-kappaB[A];2011广东省预防医学会学术年会资料汇编[C];2011年

2 飞翔;唐晓杰;丁惠强;锁志刚;樊涛;;JAK/STAT信号转导通路在大鼠急性脊髓损伤中的异常激活及意义[A];第三届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会论文集[C];2012年

3 飞翔;唐晓杰;丁惠强;锁志刚;樊涛;;JAK2/STAT3信号转导通路在大鼠急性脊髓损伤中对细胞凋亡的调控作用[A];第三届全国脊髓损伤治疗与康复研讨会论文集[C];2012年

4 张克山;刘永杰;成伟伟;尚佑军;逯忠新;刘湘涛;;羊传染性脓疱病毒逃避宿主免疫应答的机制[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会2014年全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2014年

5 李文峰;钟伯雄;苏松坤;;蜜蜂级型分化机理[A];2014年全国蜂产品市场信息交流会暨中国（哈尔滨）蜂业博览会论文集[C];2014年

6 Man-Man Lu;Jie Yang;Chen-Chen Feng;Juan Wang;Rui-Xue Leng;Jing Li;Hai-Feng Pan;Dong-Qing Ye;;Lack of association between OSM gene polymorphism and susceptibility to SLE in a Chinese population[A];安徽省2011年度流行病与卫生统计学学术论坛论文汇编[C];2011年

相关博士学位论文 前10条

1 龚志斌;EZH2在肝细胞癌中的表达及其功能研究[D];浙江大学;2006年

2 邵红芳;基于知识网络的肿瘤学衍生与发展研究[D];山西医科大学;2013年

3 贾园荟;组蛋白去甲基化酶PHF8参与神经分化的研究与UHRF1、UHRF2调控起始性DNA甲基化的功能研究[D];华东师范大学;2013年

4 高国振;宿主因子Cyclin T1和Sam68在Ⅰ型人免疫缺陷型病毒生活周期中的功能研究[D];武汉大学;2012年

5 王兵;生物芯片和纳米中药对肝胆肿瘤早期诊治的研究[D];华中科技大学;2013年

6 林婧;重症肌无力危象患者血清IL-17水平及其临床意义研究[D];华中科技大学;2013年

7 阿玛杜（AMADOU Ibrahim Halilou）;慢性HBV感染不同时期调节性T细胞的比例变化[D];华中科技大学;2013年

8 杜渐;胰腺癌BxPC-3细胞上清液通过上调树突状细胞miRNA-146a的表达抑制其成熟及免疫功能的研究[D];大连医科大学;2012年

9 邓亮;CREB-1在TGF-β3抗肝纤维化中的作用[D];华中科技大学;2013年

10 包通拉嘎;核小体结合模体的预测及它们在人类基因功能位点附近的分布[D];内蒙古大学;2013年

相关硕士学位论文 前10条

1 危丹明;EZH2在肝细胞癌中的表达及其意义[D];广西医科大学;2009年

2 彭笑怒;抑制聚二磷酸腺苷核糖聚合酶1减轻尼古丁诱导的人支气管上皮细胞炎症反应的研究[D];山东大学;2013年

3 潘晨琛;Cre重组酶介导的神经元条件死亡系统的构建及应用[D];兰州大学;2013年

4 王栋;小鼠胸腺对纳米级化学异物与异种细胞的免疫应答[D];山东大学;2013年

5 孙忠文;2型糖尿病大鼠脑组织TIPE2和TNFAIP8的表达特征及其与Aβ1-40沉积的相关性[D];山东大学;2013年

6 马银杏;以NF-κB为靶点筛选苓甲抗癌复方有效组分[D];兰州大学;2013年

7 马丽斌;丙泊酚和七氟烷对单肺通气下行食管癌根治术患者炎症反应及肺功能的影响[D];郑州大学;2013年

8 雷学华;重编程因子对小鼠组蛋白H3K4/27甲基化酶基因启动子活性的影响[D];安徽大学;2013年

9 葛立业;组蛋白甲基化转移酶NSD2、EZH2在B细胞淋巴瘤中的表达[D];大理学院;2013年

10 薛飞;盐藻丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因DsSTPK的克隆和表达分析[D];大连海洋大学;2013年

本文编号：2698078