IUGR对CG-IUGR大鼠CLOCK和BMAL1表达的影响

发布时间：2020-06-23 15:24

【摘要】：目的:本实验采用低热量饮食法复制具有生长追赶的宫内发育迟缓(CG-IUGR)成年大鼠模型,检测大鼠糖脂代谢的变化,检测肝脏及骨骼肌组织中钟基因CLOCK和BMAL1的表达水平,分析IUGR对成年CG-IUGR大鼠生物钟基因CLOCK、BMAL1表达的影响及其在成年CG-IUGR大鼠糖脂代谢异常中的可能作用。方法:选取SD大鼠为实验动物,分为control组和CG-IUGR组。采用低热量饮食法复制成年CG-IUGR大鼠模型。1.测量两组大鼠的体重和身长(从出生第一天开始至8w龄)并计算其体重指数(BMI);称量两组大鼠8w龄时的肾周脂肪重量。2.检测两组大鼠糖脂代谢的相关指标:(1)血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)及游离脂肪酸(FFA)水平;(2)空腹血糖(FBG)及血清胰岛素(FINS)水平;(3)葡萄糖耐量实验(GTT)和胰岛素耐量实验(ITT);(4)葡萄糖负荷15min后的血清胰岛素(INS)水平;3.检测肝脏和骨骼肌糖原合成酶(GS)的活性。4.通过实时荧光定量聚合酶链式反应(RTFQ-PCR)和免疫印迹法(Western Blot)技术分别检测两组大鼠肝脏和骨骼肌组织中CLOCK和BMAL1 mRNA和蛋白的相对表达;5.采用Pearson,s法,分析CLOCK和BMAL1 mRNA相对表达水平与GS酶活性的相关性。结果:1.CG-IUGR组大鼠生长发育的过程中体重和BMI均显著高于control组大鼠;其8w龄的肾周脂肪重量也显著增加(P0.05)。2.与control组大鼠相比,CG-IUGR大鼠的血清TG、TC及FFA的水平均显著增加(P0.05);血清FINS水平降低(P0.05);葡萄糖和INS负荷后的血糖水平均显著增加(P0.05);葡萄糖负荷后15min时的血清INS水平亦明显增加(P0.05)。3.与control组大鼠相比,CG-IUGR大鼠肝脏和骨骼肌组织的GS酶活性均降低(P0.05)。4.与control组大鼠相比较,CG-IUGR大鼠肝脏和骨骼肌组织中CLOCK和BMAL1 mRNA及蛋白的相对表达水平均下降(P0.05)。5.CG-IUGR组大鼠肝脏和骨骼肌组织中CLOCK和BMAL1 mRNA的相对表达水平与其GS酶的活性呈正相关性(P0.05)。结论:1.IUGR可降低成年CG-IUGR大鼠糖脂代谢的能力和肝脏及骨骼肌组织中GS酶的活性。2.IUGR可下调成年CG-IUGR大鼠肝脏和骨骼肌组织中CLOCK和BMAL1的相对表达水平,这可能与成年CG-IUGR大鼠糖脂代谢紊乱的发生有关。
【学位授予单位】：遵义医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R363
【图文】：

遵义医学院硕士学术论文 杜运松Temperature Time Cycle95℃ 30s 195℃ 5s 3955-65℃ 30s 3965℃ 0.05s 195℃ 10s 1(3)如下图可知溶解曲线呈现单一峰，选择 Cq 值最小的孔相对应的温度选为最佳温度。CLOCK、BMAL1 及β-actin 基因的最佳退火温度依次为 59℃、60℃、56℃，见图 2、3、4。

(3)如下图可知溶解曲线呈现单一峰，选择 Cq 值最小的孔相对应的温度选为最佳温度。CLOCK、BMAL1 及β-actin 基因的最佳退火温度依次为 59℃、60℃、56℃，见图 2、3、4。图 2 CLOCK 退火温度优化扩增曲线和溶解曲线Fig2 The amplification and dissociation curve of CLOCK in its optimizationof annealing temperature

【参考文献】

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本文编号：2727530