淫羊藿对兔腰椎间盘退变模型软骨组织中BMP-2、BMP-4基因表达水平的影响

发布时间：2020-07-02 09:27

【摘要】：背景:椎间盘退行性病变(Intervertebral Disc Degeneration,IVDD)是骨科常见病,是指腰椎自然老化、退化的病理及生理过程,常表现为下腰痛及急性下肢神经根性病变,严重影响人们的生活和工作。目前,对腰椎间盘退变发生的机制尚未明确。近年来发现,炎症因素、生长因子异常表达等均与椎间盘退变发生有关,其中骨形态发生蛋白(BMPs)是一类诱导成骨形成的酸性多肽,能够刺激细胞生长,属于转化生长因子β(TGF-β)超家族成员,在骨组织形成过程中发挥重要调节作用,并积极促进椎间盘合成及代谢。目前已发现多种BMPs亚成员与骨质疏松性疾病发生有关,其中BMP-2、BMP-4已成为临床研究热点。淫羊藿则为小檗科植物大花淫羊藿、箭叶淫羊藿、心叶淫羊藿全草,主要化学成分为黄酮、淫羊藿苷、多糖等,属传统补肾壮阳、强筋健骨药物,可拮抗骨质疏松。有动物试验证实,淫羊藿总黄酮可促进体外培养大鼠成骨细胞增殖及分化,这对研究淫羊藿对腰椎间盘退变患者软骨组织BMPs的影响提供了可能。目的:本研究建立兔腰椎间盘退变模型,分别予淫羊藿、生理盐水干预,并检测软骨组织BMP-2、BMP-4蛋白的表达,旨在明确淫羊藿对腰椎间盘退变软骨组织骨形态发生蛋白的影响,为淫羊藿的临床应用提供依据。方法:取30只新西兰大白兔,分为假手术组、模型组、淫羊藿组各10只,除假手术组外均建立腰椎间盘退变模型,淫羊藿组给予10mg/kg·d淫羊藿药液灌胃,模型组给予同等剂量生理盐水灌胃,90d收集各组腰椎软骨终板标本,观察组织形态改变情况。采用免疫组化法测定凋亡因子fas受体表达,最后用蛋白印迹分析法(western blot)对假手术组、模型组、淫羊藿组中BMP-2、BMP-4蛋白的表达情况进行检测。结果:1.倒置显微镜下见染色后细胞核及细胞骨架颜色较深,细胞核周围分布深紫色异染颗粒,细胞骨架部分呈均匀蓝色,可鉴定此细胞为软骨终板细胞;荧光倒置显微镜下见不同波段光的激发下,细胞骨架部分呈绿色荧光,细胞核部分未见绿色荧光标记,可鉴定此细胞为软骨终板细胞。2.假手术组终板组织结构完整,表面光滑,排列规律,软骨细胞饱满,呈圆形或椭圆形,柱状排列,软骨基质着色均匀;模型组软骨表面粗糙,局部缺损,组织结构不完整,软骨细胞分布不均,排列紊乱,部分区见软骨细胞克隆增生,呈簇状分布,软骨基质着色浅,不规律,潮线扭曲,不完整;淫羊藿组软骨细胞尚完整,细胞排列尚规律,细胞凋亡少,软骨基质染色较均匀,潮线尚且完整。3.模型组、淫羊藿组fas受体阳性率高于假手术组(P0.05),淫羊藿组fas受体阳性率低于模型组,比较差异有统计学意义(P0.05)。4.Western Blot检测结果表明:与其他两组相比,假手术组BMP-2、BMP-4蛋白相对表达量明显高于其他两组(P0.05);淫羊藿组BMP-2、BMP-4蛋白相对表达量明显高于模型组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:淫羊藿可上调兔腰椎间盘退变模型软骨组织BMP-2、BMP-4蛋白表达,促进成骨细胞增殖、分化。
【学位授予单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R681.5;R-332

【参考文献】