小鼠结直肠癌生殖器官移植肿瘤动物模型的建立

发布时间：2020-07-12 01:52

【摘要】：结直肠癌(CRC)是最常见的严重威胁人类生命健康的高发恶性肿瘤之一,全球发病率居第三位,且一旦发生转移,病死率会大幅提高。有研究显示,生殖器官是该病的主要转移器官之一,且约占非生殖器官来源的转移性卵巢癌的62.9%。但结直肠癌在生殖器官部位转移的过程和治疗方法以及相关药物的研究都鲜有报道。且目前结直肠癌转移相关机制尚未明确,移植动物模型该病的研究中仍有着重要价值。基于以上原因,建立一种稳定发生在生殖器官部位的结直肠癌肿瘤动物模型对于研究结直肠癌转移后的治疗方法与抗肿瘤药物研发就具有重要的意义。本研究以BALB/c小鼠为试验对象,将小鼠按性别分为A、C(雄性)和B、D(雌性)四个试验组各50只。为避免成瘤位置扩散,均采用CT26细胞经皮下传3代培养后制成的细胞悬液,分别通过纤维蛋白凝胶移植接种(A、B组)和荷包缝合移植接种(C、D组)两种手术方法,外科微创手术移植固定于小鼠生殖器官皮下,观察小鼠生理状况、成瘤率、移植瘤成长形状,并和对照组(仅采取皮下注射肿瘤细胞悬液方式)建模成功率进行比较分析,留瘤体组织标本做病理切片。通过SPSS19.0统计学分析以评判建立更为稳定、经济、高效的建模方法。结果显示:1.纤维蛋白凝胶移植接种试验组综合成瘤率(72%)显著高于荷包缝合移植接种试验组综合成瘤率(59%)(P0.05);2.CT26细胞株皮下传代培养移植试验组综合成活率(131/200)65.50%极显著高于皮下注射原代CT26细胞悬液对照组成活率(13/80)16.25%(P0.01)。3.手术移植接种成瘤小鼠平均生存天数25.86d,A组平均成瘤时间13.37d,B组平均成瘤时间12.33d,C组平均成瘤时间15.66d,D组平均成瘤时间14.25d。本研究结果表明:纤维蛋白凝胶移植成瘤组织病理特征符合肿瘤学动物模型需求。对BALB/c小鼠采用纤维蛋白凝胶粘合法移植接种经三次皮下传代培养的CT26细胞悬液可建立稳定、经济、高效的结直肠癌生殖器官移植肿瘤动物模型,本试验建模方法可为该种疾病的研究提供参考。
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R-332;R735.34
【图文】：

体外培养,传代培养,生长速率,细胞倍增时间

图 2-1 鼠源结肠腺癌 CT26 体外培养图 2-2 传代培养后细胞生理特征（HE×100）Fig.2-1 In vitro cultured CT26 cellsFig.2-2 Pathological characteristic of subcultured cells of implanted tumor(HE×100)3.4 细胞生长曲线从生长曲线图 2-3 可以看出，两个细胞前期生长速度无明显差异，但后期传代培养组的生长速率优于于原代细胞株培养组。由公式算出传代培养组 CT26 与原代细胞株培养组 CT26 细胞倍增时间分别为 31.5h 和 33.5h，同样说明传代培养组细胞的生长速率高于原代细胞株培养组细胞。

传代培养,生长速率

生长曲线,细胞株,生长曲线,四倍体

图 2-3 试验组和对比组细胞株生长曲线图Fig.2-3 Growth curve of subcultured CT26 cells3.5 染色体核型检查传代培养组 CT26 细胞与原代组 CT26 细胞染色体均为近端着丝粒，呈短棒状显示为鼠源染色体。二者均呈异倍体核型，以拟四倍体为主。染色体范围为 50 至130 条，众数为 67 至 80。四倍体占 40%，超三倍体占 35%，亚三倍体占 10%，超二倍体占 5%。结果显示该细胞具有恶性肿瘤细胞染色体的特点。

【相似文献】