大鼠骨关节炎模型的建立及软骨组织中MMP13和ADAMTS5的表达

发布时间：2020-07-13 18:56

【摘要】：目的:评价大鼠膝关节内侧副韧带离断+内侧半月板切除制作骨关节炎(OA)模型的方法的可行性,探讨MMP-13和ADAMTS-5蛋白在大鼠骨关节炎模型不同时期软骨组织中的表达情况。方法:雌性SD大鼠40只,随机数字法分为模型组(n=30)和假手术组(n=10),模型组大鼠采用膝关节内侧副韧带离断+内侧半月板切除制作膝OA模型,假手术组大鼠打开膝关节囊后缝合。模型组大鼠分别于术后4、6、8周处死,假手术组大鼠于术后8周处死。解剖大鼠术侧膝关节,对退变关节软骨大体观察,进行软骨损伤评分;行HE染色组织学观察;剩余软骨组织分别采用Western blot技术及免疫组化方法测定假手术组与模型组不同时期软骨组织中MMP-13和ADAMTS-5蛋白表达情况。结果:(1)大体观察结果显示:模型组术后4周即可见软骨退变,6周和8周时退变进一步加重,假手术组无明显软骨退变。不同组别相比大鼠关节软骨损伤评分差异有统计学统计学意义(P0.05)。(2)HE染色结果显示:假手术组大鼠右膝关节软骨面光滑,软骨细胞数量正常;模型组术后4周大鼠右膝关节软骨面可见糜烂或浅溃疡,关节表层软骨细胞少许丢失;模型组术后6周大鼠右膝关节软骨面可见较深裂隙,呈溃疡、糜烂,少量软骨面剥脱;模型组术后8周大鼠右膝关节软骨面可见大部分软骨面剥脱,关节表层软骨细胞大部分丢失。(3)Western blot检测结果显示,MMP-13及ADAMTS-5的蛋白表达在假手术组水平均较低。MMP-13蛋白表达于造模4周时开始升高,到造模第6周时持续升高,造模第8周是表达水平较前降低。假手术组、造模4周组、造模6周组和造模8周组之间蛋白表达比较差异有统计学意义(P0.05)。ADAMTS-5造模6周时开始升高,造模8周时维持之前表达水平。假手术组与造模4周组相比蛋白表达水平无统计学差异(P0.05),假手术组分别与造模6周组和造模8周组之间相比蛋白表达有统计学差异(P0.05),造模4周组分别与造模6周组和造模8周组之间相比蛋白表达有统计学差异(P0.05),造模6周组和造模8周组相比大鼠关节软骨组织中蛋白表达差异无统计学意义(P0.05)。免疫组化检测蛋白表达趋势与Western blot检测结果一致。结论:采用膝关节内侧副韧带离断+内侧半月板切除的方法可建立动物OA模型;MMP-13和ADAMTS-5在OA发病过程中的不同时期表达水平有明显变化,可作为OA防治研究中的评价指标,仍需要进一步的研究来探讨其相关信号通路。
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R684.3;R-332

【参考文献】

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本文编号：2753842