雌激素改善失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩功能的作用

发布时间：2020-07-30 19:02

【摘要】：淋巴管功能与失血性休克的进展密切相关,良好的淋巴管收缩性功能有助于失血性休克的好转。研究证实,雌激素通过与心、肺、肝等组织器官上的受体结合,抑制炎症反应,改善心、肺、肝功能、减轻组织损伤,从而改善失血性休克的预后。但雌激素及其受体对失血性休克后肠系膜淋巴微循环障碍能否改善,犹未可知。内质网是一种重要的细胞器,不仅在蛋白质的修饰、折叠和成熟中至关重要,而且对维持钙稳态也至关重要。失血性休克后,过度的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)引起的细胞凋亡,加重了组织细胞损伤。研究报道,雌激素可减轻ERS引起的组织细胞损伤,但ERS在失血性休克后肠系膜淋巴管收缩功能障碍中的作用,尚未见报道。据此猜想,雌激素是否可以提高失血性休克后肠系膜淋巴管的收缩功能?抑制ERS对失血性休克后肠系膜淋巴管收缩功能有何影响?雌激素是否通过抑制失血性休克引起的ERS而提高肠系膜淋巴管的功能,进而减轻淋巴微循环障碍?这些均需要进一步验证。为此,本实验复制大鼠失血性休克模型,以活体肠系膜淋巴管收缩性、离体肠系膜淋巴管收缩反应性及其与Ca~(2+)浓度关系等指标作为肠系膜淋巴管收缩功能的指标,研究:(1)雌激素及其受体激动剂PPT、DPN、G1对失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩功能的作用;(2)雌激素受体(ER)抑制剂ICI、G15对雌激素改善失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩性的作用;(3)ERS抑制剂4-PBA对失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩性的作用;(4)ERS激动剂XCT-790对雌激素及其受体激动剂PPT、DPN、G1作用后失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩性的作用。通过上述实验,揭示ERS在雌激素通过其受体改善失血性休克肠系膜淋巴管收缩性中的作用,明确雌激素改善失血性休克肠系膜淋巴管功能的机制,为失血性休克的防治提供新的实验资料。清洁级健康、雄性Wistar大鼠144只,体重280±20g,适应性饲养后,随机均分为假手术组、休克组、假手术/休克+E2组、假手术/休克+PPT组、假手术/休克+DPN组、假手术/休克+G-1组、假手术/休克+E~(2+)G15组、假手术/休克+E~(2+)ICI组、假手术/休克+XCT-790+E2组、假手术/休克+XCT-790+PPT组、假手术/休克+XCT-790+DPN组、假手术/休克+XCT-790+G-1组、假手术/休克+4-PBA组,共24组。假手术组及假手术加药组均进行双侧股部、腹部手术,均不放血,血压监测;休克组及休克加药组均进行双侧股部、腹部手术,建立失血性休克模型(维持平均动脉血压40±2 mm Hg,持续1.5 h后进行复苏)。药物干预均在液体复苏时或相应时间点进行皮下注射。所有大鼠在液体复苏结合后3 h或相应时间点,进行活体肠系膜淋巴管的观察,记录淋巴管的最大收缩口径、最大舒张口径、静态口径以及收缩频率(CF),计算淋巴管收缩性的三个指数IndexⅠ、IndexⅡ和L.D-Index,评价活体肠系膜淋巴管收缩功能。结果显示,休克组大鼠活性肠系膜淋巴管收缩功能均显著低于假手术组;雌激素及其受体激动剂、ERS抑制剂4-PBA均可分别改善假手术组、休克组大鼠活体肠系膜淋巴管收缩功能;ERS激动剂XCT-790均抑制了雌激素及其受体激动剂对假手术组、休克组大鼠活体肠系膜淋巴管收缩功能的改善作用。在上述活体肠系膜淋巴管观察结束后,留取各组肠系膜淋巴管,制备离体肠系膜淋巴管环,按照我室常规方法孵育,在孵育过程中,加入荧光Fura-2,应用Ionoptix系统,记录淋巴管钙瞬变基值、钙瞬变峰值、收缩末期口径(ESD)、舒张末期口径(EDD)、收缩频率(CF)、被动管径(PD)以及依次加入不同浓度P物质(1×10-8 mol/L、3×10-8mol/L、1×10-7 mol/L、3×10-7 mol/L)后的ESD、EDD、CF,依次计算钙瞬变差值、紧张指数(TI)、收缩幅度(CA)、泵流分数(FPF),联合CF作为评价淋巴管收缩功能的指标;计算不同SP浓度下,TI、CA、CF、FPF与基础状态下的最大差值,作为评价淋巴管反应性的指标。结果发现,休克组大鼠离体肠系膜淋巴管收缩性与反应性、钙离子瞬变差值均显著低于假手术组;雌激素及其受体激动剂、4-PBA对假手术组、休克组大鼠反映离体肠系膜淋巴管收缩性与反应性的一些指标均有一定的改善作用,提高了钙瞬变差值;XCT-790均抑制了雌激素及其受体激动剂对假手术组、休克组大鼠离体肠系膜淋巴管收缩性与反应性的改善作用,降低了钙瞬变差值。上述研究,雌激素及其受体可明显改善失血性休克后肠系膜淋巴管的收缩功能,该作用被ER抑制剂ICI、G15所抑制;抑制ERS能改善失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩功能;增强ERS抑制了E2、PPT、DPN、G1提高失血性休克大鼠肠系膜淋巴管收缩功能的作用。这些研究表明,雌激素通过雌激素受体改善了失血性休克后肠系膜淋巴管收缩功能,其机制与抑制ERS有关。
【学位授予单位】：河北北方学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R459.7;R-332

【参考文献】