【摘要】：目的:本实验通过研究低频电针对空白组大鼠、PCOS模型组大鼠(99.99%脱氢表雄酮(DHEA)注射造模)和高脂饮食组大鼠(高脂饮食造模)穴位(关元、中极、子宫、三阴交)进行干预,通过检测各组大鼠OGTT、血清脂代谢指标(HDL-C、LDL-C、TG、TC),探索低频电针是否可以改善PCOS模型大鼠和高脂饮食组大鼠机体糖、脂代谢异常;通过检测肝脏组织油红“O”染色和RT-PCR检测观察各组大鼠肝脏组织中(GSK3-β、INSR、GLUT1、GLUT4、PPARα、PPARγ、SREBF1、SREBF2)mRNA含量,探索低频电针能否改善代谢异常(PCOS及肥胖)模型大鼠肝脏组织中糖、脂代谢相关因子的影响,阐明低频电针对PCOS患者及肥胖型妇女糖、脂代谢紊乱具有调节作用进而发挥治疗作用。方法:选用21日龄清洁级雌性大鼠(SD)(体重50±5g),随后采用方位表示法随机将48只SD雌性大鼠进行分组,分为6组每组8只(n=8),分别为空白组、空白针刺组、PCOS组、PCOS针刺组、高脂饮食组、高脂饮食针刺组;造模:①将随机分组后的PCOS组、PCOS针刺组分组后即开始给予大鼠颈背部皮下注射(DHEA(60mg/100g)溶于0.2ml注射用大豆油中),其余各组大鼠每日注射0.2ml注射用大豆油;②将随机分组后的高脂饮食组、高脂饮食针刺组大鼠分组后即开始给予高脂饲料,其余各组大鼠给予基础饲料。于造模21天后进行模型评估,模型评估:①大鼠的一般情况即大鼠的体重变化情况;②观察各组大鼠动情周期情况;③大鼠卵巢局部HE染色。低频电针干预:模型评估后(即造模21天后)进行低频电针干预,连续波,频率:2Hz,1次/天,5天/周,连续5周。第一周15分钟/次,第二、三周20分钟/次,第四、五周25分钟/次。穴位为关元,中级,子宫,三阴交。取材:于低频电针干预结束前2周行阴道涂片,观察各组大鼠动情周期,在进入第二个规律动情周期的时,给予眼眶取血后脱颈处死处理,同时迅速的取出各部大鼠肝脏组织,并称重后快速放入液氮内冷冻后转移至-70℃冰箱保存。检测指标:OGTT、血清脂代谢相关指标、卵巢HE染色、肝脏组织油红“O”染色和RT-PCR检测观察各组大鼠肝脏组织中(GSK3-β、INSR、GLUT1、GLUT4、PPARα、PPARγ、SREBF1、SREBF2)mRNA的相对表达量。结果:1.大鼠喂养期间一般情况良好,生命体征平稳,毛色润泽,活动良好,进食水良好。空白针刺组与空白组、PCOS组和PCOS针刺组、高脂饮食组和高脂饮食针刺组各组大鼠间体重有差异,说明针刺治疗后可见空白针刺组、PCOS针刺组和高脂饮食针刺组各组大鼠之间体重明显较空白针刺组、PCOS针刺组和高脂饮食针刺组大鼠的体重均明显下降,故低频电针干预后,有使大鼠体重降低的作用。2.PCOS模型大鼠的模型评估:本实验中模型组大鼠在动情周期上表现为动情周期紊乱状态,PCOS组与空白组相比较,PCOS针刺组与PCOS组相比较,具有统计学意义,组间差异显著;在卵巢切片的HE染色中实验结果显示PCOS组的卵巢呈多囊样改变。3.低频电针对各种大鼠血清中糖、脂代谢研究:OTTG:30min时PCOS针刺组与PCOS组比较,60min时PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食针刺组与高脂饮食组比较,180min时空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05)。血清脂代谢(HDL-C、LDL-C、TG、TC):HDL-C中可见PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食针刺组与高脂饮食组比较,具有统计学意义(p0.05);TG中可见空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05);TC中可见空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05),LDL-C中可见空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05)。4.低频电针对各组大鼠肝脏组织中糖、脂代谢研究:在肝脏组织中GSK3-β、INSR、GLUT1、GLUT4、PPARα、PPARy、SREBF1、SREBF2的mRNA相对表达量。GSK3-β中空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05);INSR中空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食针刺组与高脂饮食组比较,具有统计学意义(p0.05);GLUT1、GLUT4中空白组与PCOS组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食针刺组与高脂饮食组比较,具有统计学意义(p0.05);PPARα中PCOS组与空白组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食组与高脂饮食针刺组比较,具有统计学意义(p0.05),PPARγ中PCOS组与空白组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,具有统计学意义(p0.05);SREBF1、SREBF2中PCOS组与空白组比较,PCOS针刺组与PCOS组比较,高脂饮食组与高脂饮食针刺组比较,具有统计学意义(p0.05)。结论:1.低频电针对代谢异常(PCOS及肥胖)模型大鼠糖、脂代谢有调节作用。2.低频电针可通过改善多囊卵巢综合征大鼠肝脏局部糖、脂代谢的异常,进而发挥对多囊卵巢综合征治疗作用。3.基于本实验研究结果推测低频电针可能通过改善多囊卵巢综合征患者肝脏局部糖脂代谢相关因子,进行可能对多囊卵巢综合征患者生殖机能产生调节作用。
【学位授予单位】：黑龙江中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：R245;R-332
【参考文献】
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2807076
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