人胚胎干细胞与内胚层细胞中初级纤毛的形态学比较

发布时间：2020-10-14 01:18

　　 目的:研究内胚层分化过程中初级纤毛的形态变化及纤毛合成有关基因的表达变化。方法:通过免疫荧光检测人胚胎干细胞和内胚层细胞内中心粒周蛋白及乙酰化微管蛋白的表达,利用qRT-PCR测定纤毛合成有关基因的表达。结果:初级纤毛同时存在于两种细胞中;与人胚胎干细胞比较,内胚层细胞的纤毛明显缩短,KIF17和IFT172基因表达显著下调。结论:初级纤毛在内胚层分化过程中会变短。
【部分图文】：

广东化工2019年第22期·8·www.gdchem.com第46卷总第408期图1hESCs和DE细胞中存在初级纤毛Fig.1PresenceofprimaryciliainbothhESCsandDEs2.2与初级纤毛合成有关基因的表达情况qRT-PCR分析发现，与未分化的hESCs相比，DE细胞中驱动蛋白基因(KIF17)和纤毛内转运蛋白复合物B基因(IFT172)的表达量都显著下调，见图2。图2hESCs和DE细胞中KIF17和IFT172基因的表达情况Fig.2GeneexpressionofKIF17andIFT172inbothhESCsandDEs3讨论初级纤毛是一种突出于细胞表面的细胞器，广泛存在于多种类型的细胞中，它是细胞的信号感受器。初级纤毛的基部由中心体母中心粒构成，中心粒顶端生长出纤毛的轴丝。对于不同类型的细胞而言，细胞表面初级纤毛的长度有显著差异。初级纤毛的组装过程是由纤毛内转运蛋白(IFT)复合物B以及驱动蛋白-2介导，使纤毛蛋白从细胞质沿轴丝向纤毛顶端转运完成纤毛的装配[6]。IFT复合物B和驱动蛋白-2对于初级纤毛的装配和维持至关重要，在大多数情况下，任何IFT复合物B蛋白或驱动蛋白-2的缺失都会导致纤毛的缩短或缺失[7,8]。人胚胎干细胞的分化与胚胎早期发育过程相似，是研究人类胚胎早期发育机制的重要工具。将hESCs定向分化为DE细胞，初级纤毛的长度显著缩短，母中心粒附近的微管蛋白浓度升高，与纤毛合成有关的KIF17、IFT172基因在细胞内的表达量显著减少。KIF17蛋白是构成驱动蛋白-2的元件之一，IFT172蛋白是组成纤毛内转运蛋白复合物B的成分之一。二者基因表达水平的降低与免疫荧光染色的结果一致，揭示了人多能
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本文编号：2839965