毛囊内特洛细胞的鉴定及分选

发布时间：2020-10-23 16:31

　　 目的:观察人头皮组织中特洛细胞(TCs)的位置,形态以及超微结构。培养、分选和鉴定TCs。方法:在这项研究中使用的是人头皮组织,在最初的实验中,采用免疫组化结合透射电镜技术,观察人头皮组织TCs的分布,研究TCs与邻近细胞的空间关系。培养人头皮组织的细胞,通过荧光激活细胞分选纯化TCs,最后通过特异性抗体CD34和CD117荧光染色进一步证实TCs。结果:免疫组化染色,发现人真皮的结缔组织中有许多CD34阳性细胞。它们集中围绕在毛囊、血管、汗腺、皮脂腺、血管和脂肪小叶。CD117阳性细胞主要位于真皮乳头层或围绕皮肤附属器(如毛囊和汗腺和皮脂腺)的结缔组织中。透射电镜图像(Transmission Electron Microscope,TEM)观察到TCs特殊的超微结构进一步证实了它的存在。在TEM下,这些细胞纺锤形,具有小的细胞体和长的细胞突起,包围毛囊隆起区的干细胞团。荧光激活细胞分选获取的TCs进行体外培养。这些细胞表现为纺锤形,具有念珠状的突起,阳性表达CD34和C-kit/CD117。结论:在正常人头皮组织中检测到两个TCs亚群,一种表达CD34,另一种表达C-kit/CD117。其围绕干细胞,可能参与皮肤的稳态,重构与再生。背景:丙烯酸/丙烯酰胺聚合物具有良好的光学性能和生物相容性,是理想的生物材料,已广泛应用于组织工程。Muse细胞是间充质干细胞的亚型,在再生医学方面有很好的前景。目的:探讨不同组成的聚丙烯酸酯聚合物,对从正常人真皮成纤维细胞获取的Muse细胞的粘附、增殖和分化的影响。方法:获取正常人真皮成纤维细胞,0.25%胰酶处理16h,甲基纤维素(Methylcellulose,MC)培养基悬浮培养,将获取的拟胚体样Muse细胞簇胰酶消化成单个细胞,将消化好的单个细胞接种在275种不同的丙烯酸/丙烯酰胺聚合物芯片上。根据Muse细胞粘附与生长状态,筛选出适合它生长的特异性聚合物,并制成二级芯片。观察Muse细胞在候选物芯片上的生长,增殖以及分化状态,进一步筛选出最适合其生长的聚合物。结果:根据Muse细胞在一级芯片上的粘附与生长状态,帅选出10种适合它生长的候选物。其中,Muse细胞在6种聚合物微点内和4种聚合物微点外生长良好。此外,Muse细胞在3种聚合物微点内增殖并分化为类似成纤维细胞样的长梭形细胞;Muse细胞在1种聚合物微点内形成类似戒指征的细胞簇;在剩下的2种聚合物微点内形成的细胞簇状态最佳,环绕在4种聚合物微点外的Muse细胞增殖形成细胞簇并继续扩增形成新的子代细胞。结论:发现一种能维持Muse细胞在未分化状态下粘附、增殖和干性的理想聚合物。
【学位单位】：蚌埠医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R329.2
【部分图文】：

CD34阳性TCs与邻近的表皮平行

触形成同型连接(图. 4B)。需要注意的是我们在干细胞丰富的毛囊隆突区周围发现大量的 TCs.它们彼此连接排成同心圆(图. 6)。图 1CD34 阳性 TCs 与邻近的表皮平行 （100×）

在汗腺的分泌小管和起始排泄管周
【参考文献】

相关博士学位论文 前1条

1 刘茜;材料调控脂肪干细胞命运及其血管生成活性的研究[D];清华大学;2012年

本文编号：2853271