SOCSlsiRNA和IL-12基因共同修饰树突状细胞体外抗喉癌的免疫反应

发布时间：2020-10-31 09:24

　　 目的 探讨腺病毒负载SOCS1siRNA和IL-12基因共同修饰人喉癌细胞（Hep-2）抗原致敏的树突状细胞（DC）在体外诱导﹑激活T淋巴细胞使成为细胞毒性T细胞（CTL）的免疫杀伤Hep-2的效能及相关免疫机制。 方法 用重组腺病毒（Ad）负载SOCS1siRNA基因和重组腺病毒负载IL-12基因修饰人外周血单个核细胞(PBMC)来源的树突状细胞（DC）；反复冻融法提取Hep-2粗提抗原（TAA）致敏的基因修饰的DC；倒置荧光显微镜观察荧光转染率；Western blot检测腺病毒转染的SOCS1和IL-12蛋白表达情况；ELISA法检测各组DC及CTL分泌IL-12和IFN-γ的水平；MTT法检测DC刺激同源T淋巴细胞增殖能力及CTL免疫杀伤Hep-2的效能；统计学分析各组间的差异。 结果 DC在体外由细胞因子诱导培养成功，具有典型的树突状细胞的形态学特征。倒置荧光显微镜下见Ad-GFP转染可见荧光表达率在90％以上；流式细胞术结果证实其表型CD80，CD86表达率在40％左右，符合文献报道；经SOCS1siRNA和IL-12基因共同修饰能有效的下调DC中SOCS1蛋白的表达和上调IL-12蛋白的表达，各组比较均有差异；IL-12因子的分泌率也明显高于SOCS1siRNA或IL-12的单基因转染；并促使T细胞显著增殖、活化。DC和CTL持续高分泌IFN-γ，增强了对Hep-2的特异性细胞免疫反应。 结论 （1） SOCS1siRNA和IL-12基因共同修饰喉癌抗原致敏的DC分泌的IL-12和IFN-γ的能力增强。 （2） SOCS1siRNA和IL-12基因共同修饰喉癌抗原致敏的DC与T细胞混合反应能有效的促进T细胞增殖，促进其分泌IFN-γ,IL-12从而诱导CTL更强的特异性杀伤喉癌细胞的能力。
【学位单位】：辽宁医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2012
【中图分类】：R392
【文章目录】：
中文论著摘要
英文论著摘要
英文缩略语表
前言
实验材料与方法
实验结果
讨论
结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
附录
    综述
        参考文献
    在学期间科研成绩
    致谢
    个人简历

【参考文献】

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1 ;Bone marrow-derived dendritic cells pulsed with tumor lysates induce anti-tumor immunity against gastric cancer ex vivo[J];World Journal of Gastroenterology;2008年46期

本文编号：2863761