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阿米洛利联合盐酸羟考酮注射液对癌痛模型小鼠脊髓CXCL13、脊髓背角c-fos表达的影响

发布时间:2020-11-04 19:32
   目的探讨阿米洛利联合盐酸羟考酮注射液对癌痛模型小鼠脊髓趋化因子CXC配体13(CXCL13)及脊髓背角即刻早期基因c-fos表达的影响。方法选取60只BALB/c小鼠进行研究,将其随机分为五组,分别为正常组(A组)、皮肤癌痛组(B组)、生理盐水组(C组)、阿米洛利组(D组)及阿米洛利联合盐酸羟考酮注射液组(E组),每组12只。除A组外,其余组小鼠均采用小鼠一侧后跖面皮下注射Walker256癌细胞悬液的方法来建立皮肤癌痛模型。建模成功后,A组和B组小鼠不给于任何干预措施,C组给予经鞘内注射0.9%氯化钠注射液10μl,D组给予经鞘内注射阿米洛利溶液10μl,浓度为1.5μg/μl,E组在D组基础上同时给予静脉注射0.2 mg/kg盐酸羟考酮注射液。测定各组小鼠给药前后不同时间点的疼痛反应,测定结束后取脊髓组织,应用Western blot法及反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定脊髓CXCL13和脊髓背角c-fos表达情况。结果鞘内注射前30 min,B组、C组、D组、E组小鼠的机械痛阈值较接种前均明显降低(t分别=44.18、34.50、32.05、40.18,P均0.05),且B组、C组、D组、E组小鼠鞘内注射后30 min、60 min、120 min和180 min机械痛阈值均明显低于A组(t分别=29.74、31.80、34.44、32.93;41.09、55.42、34.10、26.93;33.37、45.95、21.65、14.53;33.37、35.67、21.72、13.75,P均0.05),E组鞘内注射后60 min、120 min和180 min的机械痛阈值明显高于D组(t分别=42.52、32.56、26.63,P均0.05)。与A组比较,B组、C组、D组小鼠脊髓CXCL13蛋白表达、CXCL13 mRNA表达均上调(t分别=5.10、4.59、2.35;6.13、5.51、2.39,P均0.05),而E组小鼠脊髓CXCL13蛋白表达、CXCL13 mRNA表达与A组比较,差异均无统计学意义(t分别=0.58、0.21,P均0.05)。与A组比较,B组、C组、D组、E组小鼠脊髓背角c-fos蛋白表达、c-fos mRNA表达均上调(t分别=13.02、8.58、8.67、6.20;17.48、12.13、12.95、8.15,P均0.05),但E组c-fos蛋白表达、c-fos mRNA表达明显低于B组、C组、D组(t分别=9.34、5.44、4.15;12.78、7.79、6.80,P均0.05)。结论阿米洛利联合盐酸羟考酮注射液可用于皮肤癌小鼠癌痛过敏的缓解,该机制可能与两者联合可抑制脊髓和脊髓背角组织CXCL13、c-fos的表达有关。
【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 实验动物和分组
    1.2 方法
        1.2.1 细胞与试剂
        1.2.2 肿瘤接种
        1.2.3 药物干预
    1.3 测定指标
        1.3.1 机械痛觉阈值测定
        1.3.2 Western blot法测定CXCL13、c-fos蛋白表达
        1.3.3 RT-PCR法检测CXCL13 mRNA和c-fosmRNA TrizolmRNA表达水平
    1.4 统计学方法
2 结果
    2.1 各组小鼠不同时间点机械痛阈值比较见表2
    2.2 各组CXCL13、c-fos蛋白表达及CXCL13 mRNA、c-fos mRNA表达水平见表3
3 讨论

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