DDAB-PLGA佐剂诱导免疫增强机制的研究
发布时间：2020-12-04 22:13
乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）是一种生物安全性良好,且已被FDA批准的药用辅料,它作为疫苗传递与佐剂系统,具有诸多优点,并且是非常有利用前景的疫苗佐剂。本论文主要针对DDAB-PLGA作为疫苗佐剂诱导机体免疫增强效果的作用机制进行了研究。具体研究内容包含以下几个方面:（1）纳微球的制备。选用PLGA为材料,卵清蛋白OVA作为模型抗原,分别采用常规的水包油（O/W）复乳法和纳米沉淀法制备不同粒径（100nm和1μm）的DDAB-PLGA纳微球,并对其理化特性进行了表征。结果表示,成功制备了表面光滑,粒径均一,且分散性良好的荷正电的DDAB-PLGA纳微球。（2）纳微球的免疫效果评价。在免疫系统中,纳微球通过调控颗粒性质来调节抗原的释放行为,显著提高了其作为疫苗佐剂的免疫效果。100nm DDAB-PLGA纳米球在增强细胞和体液免疫应答方面具有潜力,而微球则更倾向于体液免疫。100nm DDAB-PLGA纳米球能够诱导更高水平的CTL应答,诱导T细胞向Th1方向极化以及较高水平的记忆性T细胞反应,激发机体强有力的免疫应答。（3）纳微球在动物体内的生物分布。将DDAB-PLGA纳微球与89Z...
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]131I标记的抗甲状腺髓样癌人源单链抗体在荷瘤裸鼠的体内分布和放射免疫显像[J]. 刘琼,庞华,李文波,周静,许璐,奚级梅. 中国医学影像技术. 2016(01)
[2]近红外荧光染料MHI-148应用于肿瘤活体成像的初步研究[J]. 张彩勤,赵勇,张海,关瑞,白冰,师长宏. 科学技术与工程. 2014(28)
[3]树突状细胞的研究进展[J]. 冯钟煦,刘剑勇. 医学综述. 2012(20)
[4]肺部病变类型及大小对18F-FDG显像T/NT比值的影响[J]. 尹立杰,李红磊,刘杰,刘晓建,颜珏,李健. 中国介入影像与治疗学. 2012(03)
[5]吴茱萸碱刺激的负载脊髓匀浆蛋白DCs促进小鼠脊髓损伤的修复[J]. 王科,赵建华,梁华平. 第三军医大学学报. 2010(03)
[6]快速膜乳化法制备粒径均一的PLGA微球和微囊[J]. 田瑞,王连艳,吴颉,张洁,曾烨婧,马光辉. 过程工程学报. 2009(04)
[7]树突状细胞提取与鉴定方法的研究进展[J]. 黄亚东,程树军. 华南国防医学杂志. 2008(04)
[8]单一剂量美法仑治愈荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的建立[J]. 李传刚,李墨林,舒晓宏,姜妙娜,贾玉杰,刘用楫. 大连医科大学学报. 2007(04)
[9]基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法及其在细胞识别中的应用[J]. 何晓晓,王柯敏,谭蔚泓,肖丹,李军,羊小海. 科学通报. 2001(16)
博士论文
[1]基于抗原装载方式的均一PLGA纳微球疫苗递送与佐剂系统的研究[D]. 刘婍.中国科学院研究生院(过程工程研究所) 2016
[2]基于均一PLA微球的新型乙肝疫苗佐剂设计制备及其免疫增强效果研究[D]. 陈小明.中国科学院研究生院(过程工程研究所) 2015
[3]sVEGFR1在imDCs发育过程中表达变化的原因、意义及相关信号通路[D]. 夏琳.山东大学 2014
[4]Siglec-G负向调节树突状细胞抗原交叉提呈功能及其作用机制研究[D]. 丁圆圆.浙江大学 2014
[5]用于小动物模型研究的扩散光学分子成像技术[D]. 陈延平.华中科技大学 2006
硕士论文
[1]聚乳酸纳米粒子的制备及其作为免疫佐剂的应用研究[D]. 徐婧.北京化工大学 2015
本文编号：2898311
【文章来源】：天津科技大学天津市
【文章页数】：79 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?ＤＣ’细胞作用的基本模式??Ｆｉｇ．?１－１?Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ?ｂａｓｉｃ?ｍｏｄｅｌ?ｏｆ?ｄｅｎｔｒｉｔｉｃ?ｃｅｌｌｓ??
３．１纳微球的制备和表征??采用常规的水包油（〇／Ｗ）复乳法结合快速膜乳化技术制备ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ微球，??采用纳米沉淀法制备ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ纳米球，制备纳微球的过程示意图如图３－１?（ａ）和??（ｂ）所示。使用动态光散射仪分别测定纳微球的粒径、粒径分布和ＰＤＩ值。表３－１和??图３－１?（ｄ）是纳微颗粒的粒径及电位表征分布图，结果显示，ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ微球的平??均粒径为１卜ｉｍ左右，测得微球的表面电荷为＋２９．７?ｍＶ左右；ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ纳米球平均??粒径为１２２．８?ｎｍ左右，表面电荷均在＋３１．５?ｍＶ左右，制备得到的两种纳微球ＰＤＩ值均??小于０．０５，说明纳微球粒径分布较窄且具有良好的分散性。扫描电镜结果如图３－１?（ｅ）??所示，由图上可以看出，所制备的ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ微球表面光滑，粒径均一，粒径均在??１?ｐｍ左右；ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ纳米球的表面也呈光滑状态，球形且大部分纳米颗粒的粒径??均为１００?ｎｍ左右。??（ａ）?ａ?｜?．．．?（ｂ）?备??Ｉ?二?ｉ／Ｈ：?山“??ｉ?户?ｊ?；你紛冰雜＊？?４?＞?ｖ－＊．?■?龜滅?冰??Ｉ?ｎ?、?ｊ?ｔ?ｍ??一?？?一?—ｖｖ??ｐＶＡ?？ｉＪｉＫｉ０ｅ?ｃｊｉ＇ｓａｌｉｊｔｓｏ?ｇｉｔｓａ?ａｉＳＨｆｊｊｆｗｉｃ?ｕ；？Ｘ〇ｎｒＨｔ？ｃｄ??ａｒｎｉｉｍｕｔｉ??ｉｃ
??殖情况进行检测。测定结果如图３－６所示，ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ纳微球处理的小鼠脾细胞显??示出更强的増殖能力，尤其是１〇〇?ｉｉｍＮＰｓ组显著高于纯抗原组和铝佐剂组，这表明??了?１００?ｎｍ?ＤＤＡＢ－ＰＬＧＡ纳米球能更有效地促进脾细胞的增殖，显示了其作为免疫佐??剂在增强免疫效果的潜力。??（ａ）??＇Ｋ???—ＳＳＳＳ?Ｓｉｉｔｍｉｂｌｃｄ??ＡＪ?－?＇＇?］（???１?Ｉ—Ｊ?ｌ?ｎ＾ｕｎｉｕｌｕｔｃｄ??Ｉｊｉｍ?ＭＰ？＊－??ｌＯＯｎｍ?ＮＰ＊．?－?ｆ－Ｈ??ａｕ?－級！故你；Ｓｔｎ??Ｉ?Ｍｍ、，Ｐ、私：级：奴Ｋ：：：：：：：：交級级??ｉｕ？ｎ＂ｉ、ｉｎ?私ｊ：规：：：班：：媒ｊ：：规媒ｊＳ：級：ｉ：：Ｈ??Ｉ?ｉ?ｔ?ｉ?ｉ??０．０?０．１?０．２?０，３?０．４?０．５??ＯＤ｛４５０?ｎｍ）??（ｂ）??Ａｇ－?—｜?＊１?＇??＇丨遍＊＊?ｉ??????＊＊＊??ｉ，ｍｐ、衣．５：：：※？：：※??－Ｊ??Ｉ?￣?ＩＴ，－－－ｊｎ－Ｔ－Ｔ，，－?ｒ?｜?—???
【参考文献】：
期刊论文
[1]131I标记的抗甲状腺髓样癌人源单链抗体在荷瘤裸鼠的体内分布和放射免疫显像[J]. 刘琼,庞华,李文波,周静,许璐,奚级梅. 中国医学影像技术. 2016(01)
[2]近红外荧光染料MHI-148应用于肿瘤活体成像的初步研究[J]. 张彩勤,赵勇,张海,关瑞,白冰,师长宏. 科学技术与工程. 2014(28)
[3]树突状细胞的研究进展[J]. 冯钟煦,刘剑勇. 医学综述. 2012(20)
[4]肺部病变类型及大小对18F-FDG显像T/NT比值的影响[J]. 尹立杰,李红磊,刘杰,刘晓建,颜珏,李健. 中国介入影像与治疗学. 2012(03)
[5]吴茱萸碱刺激的负载脊髓匀浆蛋白DCs促进小鼠脊髓损伤的修复[J]. 王科,赵建华,梁华平. 第三军医大学学报. 2010(03)
[6]快速膜乳化法制备粒径均一的PLGA微球和微囊[J]. 田瑞,王连艳,吴颉,张洁,曾烨婧,马光辉. 过程工程学报. 2009(04)
[7]树突状细胞提取与鉴定方法的研究进展[J]. 黄亚东,程树军. 华南国防医学杂志. 2008(04)
[8]单一剂量美法仑治愈荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的建立[J]. 李传刚,李墨林,舒晓宏,姜妙娜,贾玉杰,刘用楫. 大连医科大学学报. 2007(04)
[9]基于生物荧光纳米颗粒的新型荧光标记方法及其在细胞识别中的应用[J]. 何晓晓,王柯敏,谭蔚泓,肖丹,李军,羊小海. 科学通报. 2001(16)
博士论文
[1]基于抗原装载方式的均一PLGA纳微球疫苗递送与佐剂系统的研究[D]. 刘婍.中国科学院研究生院(过程工程研究所) 2016
[2]基于均一PLA微球的新型乙肝疫苗佐剂设计制备及其免疫增强效果研究[D]. 陈小明.中国科学院研究生院(过程工程研究所) 2015
[3]sVEGFR1在imDCs发育过程中表达变化的原因、意义及相关信号通路[D]. 夏琳.山东大学 2014
[4]Siglec-G负向调节树突状细胞抗原交叉提呈功能及其作用机制研究[D]. 丁圆圆.浙江大学 2014
[5]用于小动物模型研究的扩散光学分子成像技术[D]. 陈延平.华中科技大学 2006
硕士论文
[1]聚乳酸纳米粒子的制备及其作为免疫佐剂的应用研究[D]. 徐婧.北京化工大学 2015
本文编号：2898311
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