TNF-α/TNFR1介导TRADD-TRAF2-NF-κB信号通路上调小鼠骨髓源树突细胞功能及CP-25的调控作用

发布时间：2020-12-05 21:27

　　肿瘤坏死因子-α （tumor necrosis factor alpha, TNF-α）是一种具有多效生物学效应的细胞因子,在炎症反应、细胞免疫、肿瘤免疫等多种生理和病理过程中发挥重要的作用。TNF-α促进免疫调节的紊乱,参与一些炎症免疫性疾病的发病过程,如类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）等。TNF-α通过其细胞表面上的2个肿瘤坏死因子受体（tumor necrosis factor receptors, TNFR）,即TNFR1和TNFR2,发挥其生物学效应。TNF-α与其不同受体结合,介导不同的信号通路,参与不同的生理和病理作用。TNF-α与受体结合,募集下游信号蛋白分子,最终活化核转录因子-κB（nuclear factor-κB, NF-κB）参与介导免疫炎症反应。树突细胞（dendritic cells, DCs）是目前公认的体内功能最强大的专职抗原提呈细胞（antigen-presenting cell, APC）,具有调控固有免疫和适应性免疫的重要作用。DCs具有免疫原性和耐受性双重作用,未成熟树突细胞（Immature DCs, iDC... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
1 前言
2 实验材料
    2.1 实验动物
    2.2 药物与试剂
    2.3 仪器与设备
3 实验方法
    3.1 小鼠骨髓源DCs分离与培养
    3.2 小鼠骨髓源DCs的鉴定
        3.2.1 小鼠骨髓源DCs形态变化鉴定
        3.2.2 小鼠骨髓源DCs表型鉴定
    3.3 不同浓度TNF-α对小鼠骨髓源DCs表面分子CD83的影响
    3.4 TNF-α刺激小鼠骨髓源DCs不同时间对表面分子CD83的影响
    3.5 CP-25对TNF-α刺激小鼠骨髓源DCs表面分子CD80、CD86、CD40、MHC-Ⅱ和CD83的影响
    3.6 CP-25对TNF-α刺激的小鼠骨髓源DCs抗原摄取功能的影响
    3.7 TNF-α刺激的小鼠骨髓源DCs对同种异体T淋巴细胞增殖反应的影响及CP-25的作用
    3.8 流式细胞术测定CP-25对TNF-α刺激的小鼠骨髓源DCs上TNFR1和TNFR2表达的影响
    3.9 Western blot法检测CP-25对TNF-α刺激的小鼠骨髓源DCs中TNFR1、TRADD、TRAF2、NF-κB p65的表达
        3.9.1 小鼠骨髓源DCs样品的制备及蛋白质的提取
        3.9.2 蛋白质定量（Lowry法）
        3.9.3 Western blot操作步骤
    3.10 统计学处理
4 结果
    4.1 小鼠骨髓源DCs形态及表型鉴定
    4.2 不同浓度TNF-α对小鼠骨髓源DCs表面分子CD83表达的影响
    4.3 TNF-α刺激小鼠骨髓源DCs不同时间对表面分子CD83表达的影响
    4.4 TNF-α上调小鼠骨髓源DCs上CD80表达,CP-25能够下调CD80表达
    4.5 TNF-α上调骨髓源DCs表面CD86表达,CP-25抑制CD86表达
    4.6 TNF-α上调骨髓源DCs上CD40表达,CP-25下调CD40表达
    4.7 TNF-α促进骨髓源DCs表面MHC-Ⅱ的表达,CP-25抑制MHC-Ⅱ的表达
    4.8 TNF-α增强骨髓源DCs上CD83的表达,CP-25抑制CD83的表达
    4.9 TNF-α抑制骨髓源DCs对抗原的摄取能力,CP-25能够上调DCs对抗原的摄取能力
    4.10 TNF-α刺激的骨髓源DCs促进T细胞增殖反应,CP-25能够下调DCs对T细胞增殖反应的影响
    4.11 TNF-α上调骨髓源DCs表面TNFR1的表达,CP-25能够抑制TNFR1的表达
    4.12 TNF-α对TNFR2的表达无明显影响,CP-25对TNFR2也无明显下调作用
    4.13 TNF-α促进小鼠骨髓源DCs对TNFR1,TRADD,TRAF2,NF-κB p65蛋白表达,CP-25可以抑制TNFR1,TRADD,TRAF2,NF-κB p65的表达
5. 讨论
    5.1 TNF-α促进小鼠骨髓源DCs成熟,抑制抗原摄取能力,促进T细胞增殖
    5.2 TNF-α促进小鼠骨髓源DCs成熟,上调DC功能,可能与其受体TNFR1介导的TRADD-TRAF2-NF-κB信号通路有关
    5.3 CP-25抑制TNF-α刺激增高的小鼠骨髓源DCs成熟和功能可能与其调控TNF-α/TNFR1介导TRADD-TRAF2-NF-κB信号通路有关
6 结论
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]PGE2对LPS诱导小鼠骨髓源性树突细胞成熟及EP4受体表达影响[J]. 盛康亮,李影,付静静,陈镜宇,张玲玲,魏伟.  安徽医科大学学报. 2015(07)
[2]芍药苷-6-O’-苯磺酸酯体外降解动力学研究[J]. 王春,袁君,魏伟.  安徽医科大学学报. 2014(09)
[3]芍药苷-6-O’-苯磺酸酯理化性质研究[J]. 王春,袁君,魏伟.  安徽医科大学学报. 2014(02)
[4]树突细胞在类风湿性关节炎病理机制中的免疫原性和耐受性双重作用[J]. 付静静,张玲玲,魏伟.  中国药理学通报. 2012(09)
[5]重组人Ⅱ型肿瘤坏死因子受体-抗体融合蛋白联合芍药苷对人滑膜细胞增殖的影响及部分机制[J]. 解国雄,吴华勋,陈镜宇,魏伟.  安徽医科大学学报. 2012(07)
[6]小鼠髓源性树突状细胞的体外扩增及生物学特性的鉴定[J]. 余昆,苟欣,周青松,杨华安,仲伟营,夏阳.  国际检验医学杂志. 2010(06)



本文编号：2900121