小鼠抗狂犬病毒IgG抗体ELISA检测方法的建立

发布时间：2020-12-06 10:02

　　目的建立小鼠抗狂犬病毒IgG抗体ELISA检测方法,用于狂犬病小鼠模型的检测和分析。方法通过正交实验确定样品最佳稀释度和二抗最佳浓度等工作条件;并对该方法的特异性、灵敏性、稳定性等进行分析;与商品化试剂盒一同用于小鼠样品的检测,确定该ELISA方法的符合率。结果该ELISA方法的样品最佳稀释度是1∶100,二抗最佳浓度是40 ng/m L,阳性临界值为0. 121。该ELISA方法与小鼠常见病毒阳性血清无交叉反应;检测浓度下限为129μg/mL;样本三次重复的变异系数小于10%。与商品化试剂盒的符合率为100%。结论成功建立小鼠抗狂犬病毒IgG抗体ELISA检测方法,可应用于狂犬病小鼠模型的分析以及疫苗效价的评估工作中。 

【文章来源】：中国比较医学杂志. 2019年11期 第85-90页 北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 实验材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验样品
    1.2 主要试剂与仪器
    1.3 实验方法
        1.3.1 小鼠阳性血清及阴性血清的制备
        1.3.2 ELISA方法的基本流程
        1.3.3 实验条件的优化
        1.3.4 方法特异性测试
        1.3.5 方法敏感性测试
        1.3.6 方法重复性测试
        1.3.7 符合率检验
2 结果
    2.1 间接ELISA法工作条件的确定
    2.2 临界值（cut-off值）的确定
    2.3 方法特异性
    2.4 方法敏感性
    2.5 可重复性
    2.6 符合率检验
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]猪圆环病毒2型抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 徐保娟,王丽萍,崔晓霞,宫晓,孙厚民,郭伟伟,李陆梅,范根成,荣俊.  中国动物传染病学报. 2019(02)
[2]4株狂犬病毒感染小鼠的临床症状及脑组织病理学观察[J]. 徐素萍,黄小芳,刘宇明,苏荷,李晓宁,罗廷荣.  南方农业学报. 2018(03)
[3]狂犬病病毒实验室检测技术的研究进展[J]. 章雨辰,何婉婷,张鸿宇,王茹怡,陆思佳,季艳杰,粟硕.  中国预防兽医学报. 2017(05)
[4]人类巨细胞病毒IgG抗体ELISA检测试剂的研制[J]. 陈武娟,贺美荣,杨蓉,李娜,樊卫平.  免疫学杂志. 2017(04)
[5]RFFIT、FAVN、ELISA及狂犬病中和抗体检测试剂盒对狂犬病抗体检测的比较研究[J]. 于鹏程,由淑珍,卢学新,陶晓燕,刘淑清,纪军,朱武洋.  病毒学报. 2017(02)
[6]新布尼亚病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立[J]. 杜燕华,李懿,程宁宁,许汴利,黄学勇.  郑州大学学报(医学版). 2017(02)
[7]狂犬病病毒逃逸宿主天然免疫反应的研究进展[J]. 王朝,周明,傅振芳,赵凌.  生命科学. 2017(03)
[8]金黄地鼠作为狂犬病暴露后疫苗免疫动物模型的应用[J]. 汤重发,石磊泰,俞永新,李玉华,曹守春,李加,吴小红,王云鹏.  中国生物制品学杂志. 2016(03)
[9]FAVN与RFFIT在动物和人狂犬病中和抗体检测中的比较[J]. 张守峰,张菲,刘晔,王颖,米立娟,扈荣良.  国际检验医学杂志. 2015(09)
[10]双抗体夹心ELISA检测排泄物PEDV[J]. 李一经,刘博,姜艳平,崔文,唐丽杰,乔薪瑗,刘敏.  东北农业大学学报. 2015(02)



本文编号：2901193