ELA经PI3K/AKT和MARK通路促进MSCs增殖和迁移

发布时间：2020-12-10 07:52

　　目的:观察ELABELA（ELA）对骨髓间充质干细胞（Bone mesenchymal stem cells,MSCs）增殖和迁移能力的影响,并探讨可能调控机制。方法:将体外培养的MSCs分为Control组、ELA处理组（50 n M、500 n M、5μM、10μM）。MTS法检测细胞增殖,Transwell法检测细胞迁移。Western Blot法检测Control组、5μM ELA、5μM ELA+LY294002（PI3K/AKT通路抑制剂）组、5μM ELA+U0126（MARK通路抑制剂）组中AKT、p-AKT、ERK1/2、p-ERK1/2、Cyclin D1的表达情况。结果:与Control组相比,ELA处理组（50 n M、500 n M、5μM）MSCs的增殖及迁移能力显著增加（P<0.01）,其中以5μM ELA处理MSCs增殖及迁移能力最佳;与Control组相比,5μMELA组p-AKT/AKT、p-ERK/ERK、Cyclin D1的蛋白水平显著增加（均为P<0.01）,然而此效应可被LY294002及U0126阻断。结论:5μM ELA处理M... 

【文章来源】：岭南急诊医学杂志. 2020年01期 第30-33+42页

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

各组MSCs经ELA干预后0 h,24 h,48 h,72 h的A490值。与Control组比较，*P<0.01；与5μM ELA组比较，#P<0.01

本研究探讨了不同浓度ELA对MSCs的调节作用。除了浓度10μM之外，不同浓度ELA均促进MSCs的增殖及迁移能力，且呈现浓度效应，其中以ELA浓度为5μM对MSCs的调节作用达到最佳。另外，此效应能够被PI3K/AKT通路抑制剂LY294002及MARK通路抑制剂U0126阻断。鉴于此，我们推测ELA参与调节MSCs的增殖与迁移功能可能与AKT的磷酸化及ERK磷酸化有关。Western Blot结果显示，与Control组相比，5μM ELA组中p-AKT/AKT、p-ERK/ERK水平显著提高（P<0.01）；与5μM ELA组相比，5μM ELA+LY294002组及5μM ELA+U0126组中p-AKT/AKT,p-ERK/ERK的表达水平显著降低（P<0.01）。PI3K/AKT通路抑制剂LY294002及MARK通路抑制剂U0126分别抑制AKT磷酸化及ERK磷酸化后，ELA对MSCs的调节作用被阻断，因此，我们认为，ELA促进MSCs增殖及迁移功能可能与激活AKT磷酸化及ERK磷酸化有关。图3 各组MSCs磷酸化AKT/AKT水平。与Control组比较，*P<0.01；与ELA组比较，#P<0.01

图2 各组MSCs经ELA干预12 h后细胞迁移数量。以上实验均独立重复3次以上。与Control组比较，*P<0.01;与5μM ELA组比较，#P<0.01图4 各组MSCs中磷酸化ERK/ERK水平。与Control组比较，*P<0.01；与ELA组比较，#P<0.01


本文编号：2908352