六味地黄丸对兔椎间盘退变模型髓核细胞MAPK信号级联的影响
发布时间:2017-04-07 21:06
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【摘要】:目的:观察六味地黄丸对兔椎间盘退变模型髓核细胞JNK与P38信号级联的影响。方法:选取6月龄清洁级新西兰兔80只,随机分为空白对照组、假手术组、模型组、六味地黄丸组,每组20只。模型组、六味地黄丸组参照胡绪江方法建立椎间盘退变动物模型,六味地黄丸组予六味地黄丸混悬液灌胃,空白对照组、假手术组、模型组灌以等量生理盐水。每天1次,自然喂养。于最后一次灌胃后4小时分2周、4周、6周、8周分批次处死动物,留取L4/5,L5/6椎间盘标本或去除椎旁软组织、保留韧带结构的脊柱标本,冻存待测。 结果:RT-PCR和Western Blot检测结果表明,六味地黄丸组与模型组兔髓核细胞JNK、p38MAPK的mRNA含量和蛋白表达明显高于假手术组与空白组,其差异具有统计学意义(P0.05),说明椎间盘退变兔模型造模成功;假手术组与空白组JNK、p38MAPK的mRNA含量和蛋白表达无明显差距,无统计学意义(P0.05);六味地黄丸组JNK、p38MAPK的mRNA含量和蛋白表达明显低于模型组,其差异具有统计学意义(P0.05),提示六味地黄丸可能在一定程度上通过稳定JNK、 p38MAPK基因和蛋白的表达,对椎间盘髓核细胞具有保护作用。 结论:1.六味地黄丸能抑制JNK与p38MAPK通路的全面激活,保护髓核细胞,使细胞稳定,对椎间盘退变有明显的防治作用。2.六味地黄丸可能发挥类JNK与p38MAPK抑制剂作用,调节JNK与p38MAPK的表达,减缓了髓核细胞的凋亡,保护了髓核细胞。
【关键词】:六味地黄丸 JNK p38 丝裂原活化蛋白激酶(MAPK) 椎间盘退变 腰痛
【学位授予单位】:湖南中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R285.5;R-332
【目录】:
- 摘要5-6
- Abstract6-8
- 引言8-9
- 第一部分 材料与方法9-14
- 1. 实验材料9-10
- 1.1 实验动物9
- 1.2 实验用药9
- 1.3 主要试剂9-10
- 1.4 主要实验仪器10
- 2. 实验方法10-11
- 2.1 动物分组10
- 2.2 动物造模10-11
- 2.3 治疗(干预)方法11
- 2.4 标本采集11
- 3 检测指标11-13
- 3.1 检测JNK、p38MAPK的mRNA含量及蛋白表达11
- 3.2 PCR检测11-12
- 3.3 Western-blot检测12-13
- 4. 统计处理13-14
- 第二部分 结果14-22
- 1. 各组兔基本情况14
- 2. 造模成功标志14
- 3. 各组兔髓核细胞JNK信号级联mRNA及蛋白表达14-16
- 4. 各组兔髓核细胞p38信号级联mRNA及蛋白表达16-17
- 5. 实验数据分析结果17-18
- 6. mRNA扩增动力学曲线18-19
- 7. Wsetern-bolt结果19-22
- 第三部分 分析与讨论22-27
- 1. 椎间盘退变(IDD)与髓核细胞凋亡22-23
- 2. 椎间盘退变(IDD)与MAPK信号级联23-24
- 3. 椎间盘退变模型的建立24-25
- 4. 祖国医学对椎间盘退变的认识25
- 5. 六味地黄丸与椎间盘退变25-27
- 结论27-28
- 致谢28-29
- 参考文献29-32
- 附录一 文献综述32-42
- 参考文献38-42
- 附录二 计量换算42-43
- 附录三 相关实验图43
【参考文献】
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本文编号:291310
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