UHRF2通过其RING结构域抑制p21的表达对DNA损伤修复的作用机制研究

发布时间：2024-07-07 09:16

　　目的本文旨在研究E3连接酶UHRF2与p21之间的相互作用关系,探索UHRF2在修复HEK293细胞中由羟基脲(HU)引起的DNA损伤的机制。方法本文通过Western blotting检测过表达UHRF2对于p21表达量的调节作用;免疫荧光染色(IF)验证UHRF2与p21的亚细胞定位关系;免疫共沉淀(Co-IP)验证UHRF2与p21的相互结合关系以及探索其主要的结合结构域;半衰期(Half-life)实验检测UHRF2对p21半衰期的调节作用;体内泛素化实验检测UHRF2对p21的泛素化作用;Western blotting与免疫荧光染色相结合,探索UHRF2如何作用于p21来修复羟基脲引起的DNA损伤。结果Western blotting显示,在HEK293、Hela、LO2、HepG2细胞中过表达UHRF2后,HEK293、Hela细胞中p21的表达量明显降低,而LO2、HepG2细胞中p21的表达量未见有明显差异;IF与Co-IP证实,在HEK293、Hela细胞中,UHRF2与p21相互结合,且UHRF2的RING结构域为主要的结合结构域;Half-life实验证明,在H...

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1不同细胞中过表达UHRF2对p21表达量的调控作用Fig1RegulatoryeffectoftheoverexpressionofUHRF2ontheexpressionofp21in

图1不同细胞中过表达UHRF2对p21表达量的调控作用ulatoryeffectoftheoverexpressionofUHRF2ontheexpressidifferentcellsp21的亚细胞共定位、Hela细胞中UHRF2抑制....

图2UHRF2与p21的亚细胞共定位Fig2Subcellularco-localizationofUHRF2andp21

图2UHRF2与p21的亚细胞共定位Fig2Subcellularco-localizationofUHRF2andp21RF2与p21相互结合UHRF2与p21的亚细胞共定位的情况，我们需要了解UHRF2与p互结合。在HEK293、....

图3UHRF2与p21相互结合

图3UHRF2与p21相互结合Fig3UHRF2interactswithp212.4UHRF2与p21结合的主要结合结构域的测定UHRF2具有多个结构域，我们已经证实UHRF2与p21相互结合，在此我们将探察UHRF2与p21相互结....

图4UHRF2与p21的结合结构域测定Fig4ThebindingdomaindetectionofUHRF2andp21

图4UHRF2与p21的结合结构域测定Fig4ThebindingdomaindetectionofUHRF2andp212调控p21的半衰期2可以抑制p21的表达已经得到证实，这里我们继续研究UHR蛋白的半衰期产生影响。将pCMV-....

本文编号：4003488