帕金森病基因编辑猴模型诱导多能干细胞的建立及研究
发布时间：2020-12-22 10:50
研究背景:帕金森病（Parkinson’s disease,PD）是一种神经退行性疾病,其主要病理学特征是中脑黑质（Substantial nigra,SN）的多巴胺能神经元（Dopaminergic neurons,DAns）的功能异常。PD的治疗目前主要靠药物,早期患者通过药物治疗多可很好的控制症状,至疾病中期虽然药物仍有一定的作用,但常因开关效应等运动并发症的出现导致生活质量的下降。利用多能干细胞（Pluripotent stem cells,PSCs）对PD进行细胞治疗成为最有希望从根本上治愈患者的方法,其中诱导多能干细胞（Induced pluripotent stem cells,i PSCs）和胚胎干细胞（Embryonic stem cells,ESCs）的研究与应用最为引人瞩目。i PSCs可以从患者自身的体细胞中重编程得到,伦理争议和免疫排斥问题相对较小。但由于个体差异,使用时必须一对一建系,细胞间差异较大。ESCs来源单一,一次建系可供多人使用,但同时也带了免疫排斥和伦理道德上的问题。近年,美国、日本和中国等国家都相继报道了利用多能干细胞治疗PD的案例,但临床应用...
【文章来源】：昆明理工大学云南省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自体细胞移植示意图1Figure1Autologouscelltransplantation.细胞自体移植存在的问题细胞来源问题
图 2 ESCs 建系过程图 1。Figure 2 Derivation of ESCs.表 2 三种 ESCs 建系体系建系效率Tale 2 Efficiency of Three Systems for Derivation of ESCs体系 建系胚胎个数/个 得到细胞系/株 成功率PSGro 16 5 31.25%（5/16）FBS 18 4 22.22%（4/18）LCDM 24 5 20.8%（5/24）3.1.2 诱导多能干细胞建系
图 4 iPS 细胞诱导过程。 1a. 加仙台病毒前成纤维细胞，D0；b. 加病毒后 14天长出的 iPS 克隆；c. iPSCs 纯化传代，P9，比例尺 200um。Figure 4 Derivation process of iPSCs. a. Fibroblasts before add Sendai virus, D0; b. iPSclones grown 14 days after virus addition; c. Purification and passage of iPSCs, P9, scale bar200um.3.2 多能干细胞系鉴定3.2.1 多能性鉴定免疫荧光染色是为了鉴定细胞系的全能性，PSCs 中高表达 SOX 2、OCT4、Nanog、TRA-1-60、TRA-1-81 等基因，因此这些蛋白的表达可以证明细胞的全能性[99]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于人胚胎干细胞健康安全评价体系的构建[J]. 俞光岩,曹彤,邹晓晖,张学慧,傅歆,彭双清,邓旭亮,李盛林,刘鹤,肖苒,欧阳宏伟,彭晖,陈晓,赵增明,王晓颖,方海琴,路璐,任玉兰,徐明明. 北京大学学报(医学版). 2016(01)
[2]无血清培养人胚胎干细胞的体系研究与进展[J]. 张哲,曾宪卓,鲁菲,郭明辉,董慧君. 中国组织工程研究. 2015(41)
本文编号：2931628
【文章来源】：昆明理工大学云南省
【文章页数】：82 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
自体细胞移植示意图1Figure1Autologouscelltransplantation.细胞自体移植存在的问题细胞来源问题
图 2 ESCs 建系过程图 1。Figure 2 Derivation of ESCs.表 2 三种 ESCs 建系体系建系效率Tale 2 Efficiency of Three Systems for Derivation of ESCs体系 建系胚胎个数/个 得到细胞系/株 成功率PSGro 16 5 31.25%（5/16）FBS 18 4 22.22%（4/18）LCDM 24 5 20.8%（5/24）3.1.2 诱导多能干细胞建系
图 4 iPS 细胞诱导过程。 1a. 加仙台病毒前成纤维细胞，D0；b. 加病毒后 14天长出的 iPS 克隆；c. iPSCs 纯化传代，P9，比例尺 200um。Figure 4 Derivation process of iPSCs. a. Fibroblasts before add Sendai virus, D0; b. iPSclones grown 14 days after virus addition; c. Purification and passage of iPSCs, P9, scale bar200um.3.2 多能干细胞系鉴定3.2.1 多能性鉴定免疫荧光染色是为了鉴定细胞系的全能性，PSCs 中高表达 SOX 2、OCT4、Nanog、TRA-1-60、TRA-1-81 等基因，因此这些蛋白的表达可以证明细胞的全能性[99]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于人胚胎干细胞健康安全评价体系的构建[J]. 俞光岩,曹彤,邹晓晖,张学慧,傅歆,彭双清,邓旭亮,李盛林,刘鹤,肖苒,欧阳宏伟,彭晖,陈晓,赵增明,王晓颖,方海琴,路璐,任玉兰,徐明明. 北京大学学报(医学版). 2016(01)
[2]无血清培养人胚胎干细胞的体系研究与进展[J]. 张哲,曾宪卓,鲁菲,郭明辉,董慧君. 中国组织工程研究. 2015(41)
本文编号：2931628
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