小鼠NLRP3基因腺病毒干扰载体的构建及功能鉴定

发布时间：2020-12-23 13:29

　　目的构建针对小鼠NLRP3基因的腺病毒干扰载体（Ad-NLRP3-shRNA）,并在Min6和RAW264.7细胞中验证其基因沉默效率。方法针对小鼠NLRP3基因设计、合成3对NLRP3 shRNA 1-3干扰序列,重组至pHBAd-U6-CMV质粒载体。在HEK293T细胞内包装Ad-NLRP3-shRNA。感染Min6和RAW264.7细胞后,采用实时定量-聚合酶链式反应（RTQ-PCR）检测NLRP3基因表达。结果 Ad-NLRP3-shRNA 1-3在Min6和RAW264.7细胞的干扰效率分别达到44.38%、46.61%和82.83%以及47.23%、49.59%和78.64%。结论成功构建出Ad-NLRP3-shRNA载体,为研究NLRP3基因的功能提供有效工具。 

【文章来源】：右江民族医学院学报. 2019年05期

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 资料与方法
    1.1 主要菌株和试剂
    1.2 实验方法
        1.2.1 Ad-NLRP3-shRNA的构建
        1.2.2 Ad-NLRP3-shRNA包装、收毒、扩增及滴度测定
        1.2.3 Ad-NLRP3-shRNA功能验证
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 NLRP3 shRNA干扰质粒鉴定
    2.2 Ad-NLRP3-shRNA包装、收毒、扩增及滴度测定结果
    2.3 Ad-NLRP3-shRNA对Min6和RAW264.7细胞中NLRP3基因表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[8]NLRP3炎症小体与2型糖尿病的研究进展[J]. 王定坤,陈广,陆付耳.  生理科学进展. 2014(02)
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本文编号：2933797