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猪链球菌2型二元调控系统2148hk/rr的研究

发布时间:2020-12-25 19:17
  猪链球菌(Streptococcus suis, S. suis)是一种革兰氏阳性兼性厌氧菌,根据荚膜多糖(capsular polys-accharide, CPS)抗原特性差异,可将其分为35种血清型(1-34型,1/2型)。其中以猪链球菌2型(S. suis serotype 2, SS2)分布最广,致病性最强。人感染SS2后,通常出现化脓性脑膜炎、心内膜炎、伴有耳聋、运动功能紊乱等症状。1998年和2005年我国暴发的猪链球菌疫情出现了典型的链球菌中毒性休克综合征(STSS)临床症状,其发病急、病程短及高致死率等特点引起了国内外学者的广泛关注。目前对猪链球菌,尤其是我国猪链球菌流行株了解甚少,缺乏对猪链球菌毒力因子和致病机制的全面了解。虽然有几类毒力因子已被确认与猪链球菌的致病性相关,如具有抗吞噬作用的荚膜多糖(CPS)、胞外因子(EF)、溶菌酶释放蛋白(MRP)、溶血素(SLY)、精氨酸氨基肽酶(ADiS)等。国内外还鉴定出了一些可能的毒力因子,但多涉及毒力相关因子的功能性鉴定。由于不同菌株所具有的毒力因子各不相同,同一种毒力因子在不同菌株中的作用也不一定相同,同时单独研究毒... 

【文章来源】:中国人民解放军军事科学院北京市

【文章页数】:163 页

【学位级别】:博士

【部分图文】:

猪链球菌2型二元调控系统2148hk/rr的研究


芯片样点排列示意图(注:S表示subarray)

方案图,示意图,实验方案,芯片


图2-1 芯片样点排列示意图(注:S 表示subarray)DNA芯片转录谱分析采取以下的实验方案:2×2×2方案(图2-2):野生株和突变株相同培养条件下提取两份RNA(生物学重复),每份RNA逆转录成两份cDNA(技术重复)共得到8份单标cDNA,对应两两混合配对,共4张芯片,芯片上一个基因两个点(测量重复),每个基因最终得到8个数据点。

琼脂糖凝胶电泳,异丙醇,紫外分光光度计,质量


13,000rpm 离心。将上清13,000rpm 离心,弃尽异丙醇,室 DNase buffer 中。核酸沉淀溶解于下作用。解液,。加入 MPC 蛋白沉淀剂,-2中。3,000rpm 离心,弃去异丙醇。加入 75%乙醇,3,000rpm 离心,弃尽 RNA,取 1μl 用于紫外分光光度计取 RNA 的质量。


本文编号:2938242

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