增生性瘢痕组织中下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的研究
发布时间:2020-12-25 19:27
目的:观察下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴中的激素和受体在皮肤增生性瘢痕组织中的表达和布状况;检测增生性瘢痕成纤维细胞是否具有完整的HPA功能轴,探讨其与增生性瘢痕形成的关系。方法:1.应用实时荧光定量PCR以及免疫组织化学染色法,观察HPA轴的活性物质CRH、CRH-Rl、POMC、MC-2R以及GR在增生性瘢痕(n=12)和正常皮肤组织(n=7)中mRNA的表达。2.免疫组织化学染色法,观察增生性瘢痕和正常皮肤组织中CRH、CRH-Rl、ACTH、MC-2R以及GR-a阳性细胞的分布差异。3.体外培养增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞,利用浓度为10-6M、10-7M和10-8M的CRH和ACTH分别进行干预(正常成纤维细胞只用10-7M一个浓度),用ELISA试验检测上清液中ACTH、糖皮质激素的分泌量,再用实时荧光定量PCR法检测POMC的mRNA表达量。结果:1. CRH、CRH-Rl、POMC、MC-2R以及GR-α的mRNA均在瘢痕组织中有表达,其中除MC-2R外其余表达量均明显低于正常皮肤(p<0.05)。2. CRH、CRH-Rl、ACTH、MC-2R以及GR-...
【文章来源】:暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】:48 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
荧光定量PCR检测增生性瘫痕和正常皮肤组织中HPA轴激素和受体mRNA表达量(均数士标准误)
激24小时后,可于细胞上清液中检测到ACTH的分泌。不同浓度CRH均可激起瘫痕成纤维细胞分泌AcTH(p<0.05),而这功效可被cRH一Rl受体阻滞剂抑制(图3A)。将浓度为10一7M的CRH刺激正常皮肤成纤维细胞24小时后,同样可激起AcTH的分泌(p<0.05),但是相同浓度的瘫痕组和正常成纤维细胞组之间没有明显差异(图 3B)。AB创息工任H工UIV百息︸工工OV010场10一,10书阻滞剂瘫痕组织正常皮肤 CRH!MICRHIMI图3:CRH束J激瘫痕和正常皮肤成纤维细胞24h后,上清液中ACTH表达量;A:将CRH组分别与空白组和阻滞剂组相比较;B:将CRH组和空白组比较:* P<0.05;**P>0.05 F19.3CRHstimulateACTHProduetioninhyPertroPhicsearfibroblasts.The seeretionofACTHinthemedia:A:eomParedthecellsineubatedwithCRHfor24h grouPwiththeeontrolgrouPandtheantalarmingrouP:B:eomParedCRHgrouPwith
吸三一︼质酮皮︻吸二日一︼瘫痕组织正常皮肤瘫痕组织图4:CRH或表达量;A,C:空白组比较;CRH【M】ACTHACTH刺激瘫痕和正常皮肤成纤维细胞24h后,将CRH组分别与空白组和阻滞剂组相比较;B,D正常皮肤!M】上清液中皮质醇:将ACTH组和 *P<0.05;**P>0.05 F19.4CRHorACTHstimulatecortieosteroneproduetioninh即 ertrophicscar fibroblasts.Thesecretionofeorticosteroneinthemedia;AandC:eomParedtheeells incubatedwithCRHfor24hgrouPwiththecontrolgrouPandtheantalarlningrouP:B andD:comParedACTHgrouPwiththeeontrolgrouP:*P<0.05;**P>0.05皮质醉︹n吸三一︼质皮醉︻n吸日一] 010七10一,10书阻滞剂 CRHIM】ACTH!Ml图5:CRH或ACTH刺激瘫痕成纤维细胞24h后,上清液中皮质醇表达量;A:将CRI硕组分别与空白组和阻滞剂组相比较;B:将ACTH组和空白组比较。 Fig.5CRHorACTHstimulateeortieosteroneproduetioninh冲 ertrophicscar fibroblasts.Theseeretionofcortieosteroneinthemedia:A:comParedtheeells26
本文编号:2938254
【文章来源】:暨南大学广东省 211工程院校
【文章页数】:48 页
【学位级别】:硕士
【部分图文】:
荧光定量PCR检测增生性瘫痕和正常皮肤组织中HPA轴激素和受体mRNA表达量(均数士标准误)
激24小时后,可于细胞上清液中检测到ACTH的分泌。不同浓度CRH均可激起瘫痕成纤维细胞分泌AcTH(p<0.05),而这功效可被cRH一Rl受体阻滞剂抑制(图3A)。将浓度为10一7M的CRH刺激正常皮肤成纤维细胞24小时后,同样可激起AcTH的分泌(p<0.05),但是相同浓度的瘫痕组和正常成纤维细胞组之间没有明显差异(图 3B)。AB创息工任H工UIV百息︸工工OV010场10一,10书阻滞剂瘫痕组织正常皮肤 CRH!MICRHIMI图3:CRH束J激瘫痕和正常皮肤成纤维细胞24h后,上清液中ACTH表达量;A:将CRH组分别与空白组和阻滞剂组相比较;B:将CRH组和空白组比较:* P<0.05;**P>0.05 F19.3CRHstimulateACTHProduetioninhyPertroPhicsearfibroblasts.The seeretionofACTHinthemedia:A:eomParedthecellsineubatedwithCRHfor24h grouPwiththeeontrolgrouPandtheantalarmingrouP:B:eomParedCRHgrouPwith
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本文编号:2938254
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