中脑导水管周围灰质GABA能神经元在小鼠主动回避学习中的作用
发布时间：2020-12-31 10:06
中脑导水管周围灰质（Periaqueductal gray,PAG）被认为是调控厌恶情绪与防御性行为的重要神经核团,包括恐惧、威胁、焦虑情绪下出现的对抗、逃跑或者凝滞等行为。目前,对于该脑区在主动回避学习中的调节机制尚未完全明确。目的:探索中脑导水管周围灰质γ-氨基丁酸（γ-Aminobutyric acid,GABA）能神经元在主动回避学习中的调控作用。方法:通过穿梭箱实验,对实验小鼠进行主动回避训练;通过早期即刻基因c-fos免疫荧光染色确定小鼠PAG内c-fos表达的变化;利用脑立体定位注射,将携带有hM3Dq或hM4Di基因的重组腺相关病毒定位注射于Vgat-cre转基因小鼠的PAG内,待2-3周后GABA能神经元稳定表达hM3Dq或hM4Di。制备300μm厚度的PAG离体脑片,进行全细胞膜片钳记录,记录CNO对GABA能神经元活动的调节。应用化学遗传学技术,在清醒小鼠体内特异性激活或者抑制PAG的GABA能神经元,观察改变GABA能神经元的活动对小鼠主动回避学习能力的影响;结果:Vgat-ChR2-EYFP转基因小鼠在主动回避学习中存在延迟建立的特性;主动回避学习中,与正常...
【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
中脑导水管周围灰质形态学分区Figure1ThemorphologicalsubdivisionsofPAG注：小鼠中脑导水管周围灰质按照其内部神经元大小、形状和密度可分为：背侧区（dPAG）、背
前 24h 在小鼠的饲养笼中，每笼放入两瓶 1%（w/v）的蔗糖溶液，紧接着 24h 将其中的一瓶换成纯水，适应结束后，禁食禁水 24h。在测试中，小鼠可以自由活动在装有等量体积的两个水瓶之间，一瓶为 1%（w/v）的蔗糖溶液，另一瓶为纯水，禁食，12h 后，取走两瓶并称重，记录小鼠的总液体消耗，糖水消耗和纯水消耗。1.2.2 化学遗传学学实验（Designer receptors exclusively activated bydesigner drugs，DREADDs）DREADDs 是将 hM3Dq 或 hM4Di（改造过的人毒蕈碱型乙酰胆碱受体）通过 AAV 病毒载体表达在带有 Cre 酶系的神经元细胞上[35]，使用药物叠氮平-N-氧化物（clozapine-N-oxide，CNO）可以特异性地结合表达在细胞膜上的 hM3Dq 或 hM4Di 蛋白，使得表达 hM3Dq 的神经元去极化，兴奋性增AB
主动回避学习实验（穿梭箱）
本文编号：2949426
【文章来源】：桂林医学院广西壮族自治区
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【图文】：
中脑导水管周围灰质形态学分区Figure1ThemorphologicalsubdivisionsofPAG注：小鼠中脑导水管周围灰质按照其内部神经元大小、形状和密度可分为：背侧区（dPAG）、背
前 24h 在小鼠的饲养笼中，每笼放入两瓶 1%（w/v）的蔗糖溶液，紧接着 24h 将其中的一瓶换成纯水，适应结束后，禁食禁水 24h。在测试中，小鼠可以自由活动在装有等量体积的两个水瓶之间，一瓶为 1%（w/v）的蔗糖溶液，另一瓶为纯水，禁食，12h 后，取走两瓶并称重，记录小鼠的总液体消耗，糖水消耗和纯水消耗。1.2.2 化学遗传学学实验（Designer receptors exclusively activated bydesigner drugs，DREADDs）DREADDs 是将 hM3Dq 或 hM4Di（改造过的人毒蕈碱型乙酰胆碱受体）通过 AAV 病毒载体表达在带有 Cre 酶系的神经元细胞上[35]，使用药物叠氮平-N-氧化物（clozapine-N-oxide，CNO）可以特异性地结合表达在细胞膜上的 hM3Dq 或 hM4Di 蛋白，使得表达 hM3Dq 的神经元去极化，兴奋性增AB
主动回避学习实验（穿梭箱）
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