Suv39h1对糖尿病大鼠血管损伤后修复的作用及机制研究

发布时间：2021-01-03 04:52

　　目的：1.构建携带大鼠Suv39h1基因的重组腺病毒载体（Ad-Suv39h1）,观察其对大鼠血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs） Suv39h1的过表达效应；2.构建携带大鼠Suv39h1基因RNA干扰序列的重组慢病毒载体（LV-Suv39h1shRNA）,观察其对VSMCs的Suv39h1表达沉默效应；3.探讨过表达或沉默Suv39h1,对血管紧张素Ⅱ （angiotensinⅡ, AngⅡ）和高糖（high glucose, HG）诱导的VSMCs增殖和迁移的作用及其分子机制；4.探讨过表达或沉默Suv39h1,对糖尿病（diabetes mellitus, DM）大鼠颈动脉球囊损伤后血管内膜增生和内皮化的影响及其机制。方法：1.经鉴定构建成功的穿梭质粒pDC316-Suv39h1,与骨架质粒共转染293细胞,同源重组获得Ad-Suv39h1。经扩增、纯化、PCR鉴定后,测定获得的重组腺病毒载体滴度。重组腺病毒按感染复数（multiplicity of infection, MOI）0,10,15,20,25,30转染VSMCs... 

【文章来源】：武汉大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：97 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

pDC316-Suv39hl载体酶切后电泳图

重组质粒测序图

穿梭质粒pDC316-Suv39hl和骨架质粒共转染对数生长期的293细胞，在转染后8d，细胞出现了明显的唾斑，出毒迹象明显（图1.3A)，表明同源重组构建腺病毒成功。重组腺病毒Ad-Suv39hl经扩增收集的第二代毒种，PCR扩增，凝胶电泳成像后显示，在目的条带1241bp附近出现明显亮带（图1.3B)，表明收获的病毒为构建成功的重组Ad-Suv39hl。10

【参考文献】：
期刊论文
[1]Inhibitory Effects of Suppressor of Cytokine Signaling 3 on Inflammatory Cytokine Expression and Migration and Proliferation of IL-6/IFN-γ-induced Vascular Smooth Muscle Cells[J]. 向水,董念国,刘金平,王玉,史嘉玮,魏战杰,胡行健,龚立.  Journal of Huazhong University of Science and Technology（Medical Sciences）. 2013(05)



本文编号：2954351