小鼠诱导性多能干细胞向嗅受体神经元和僧帽/丛细胞分化的体外研究

发布时间：2021-01-05 08:15

　　研究背景:尽管研究表明嗅神经具有再生能力,但感觉神经性嗅觉损伤后,仅有少部分患者可以恢复嗅觉功能。目前对于感觉神经性嗅觉障碍尚无满意的治疗方法。多项研究证实,i PSCs不仅可以由体细胞重编程而来,而且其功能与胚胎干细胞（ESCs）十分类似,具有能够向各类细胞分化的能力,无免疫排斥及伦理道德问题,本实验拟探索i PSCs能否在体外被诱导分化为嗅受体神经元及僧帽/丛细胞,从而为细胞移植治疗感觉神经性嗅觉障碍提供实验基础。目的:探讨小鼠i PSCs在体外是否具有向嗅受体神经元和僧帽/丛细胞分化的潜能。研究内容和方法:1.小鼠i PSCs的培养及多能性基因鉴定:小鼠胚胎成纤维细胞提取、传代及饲养层制备,小鼠i PSCs接种于饲养层上培养,拟胚体（EB）制备,RT-PCR鉴定i PSCs多能性基因Oct4,Nanog,Sox2的情况。2.小鼠i PSCs与嗅上皮共培养及免疫学鉴定:分离小鼠嗅上皮细胞,将小鼠i PSCs与其共培养,对分化细胞用嗅受体神经元的标志物（OMP,GAP43,NCAM）进行免疫荧光及RT-PCR鉴定。3.小鼠i PSCs与嗅球共培养及免疫学鉴定:分离小鼠嗅球细胞,将小鼠... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：55 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MEF的形态

图 3.2.1 小鼠 iPSCs 形态（A）贴壁生长的小鼠 iPSCs 呈集落生长，边界清晰，形成细胞克隆盘（200× Scale Bar：100um））；（B）悬滴法收集的拟胚体呈球形或椭圆形，其内细胞连接紧密（100× Scale Bar：50um）；（C）EB 球在荧光显微镜下在蓝光的激发下发出绿色荧光（100× Scale Bar：50um）。

附图图 3.2.1 小鼠 iPSCs 形态（A）贴壁生长的小鼠 iPSCs 呈集落生长，边界清晰，形成细胞克隆盘（200× Scale Bar：100um））；（B）悬滴法收集的拟胚体呈球形或椭圆形，其内细胞连接紧密（100× Scale Bar：50um）；（C）EB 球在荧光显微镜下在蓝光的激发下发出绿色荧光（100× Scale Bar：50um）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]小鼠诱导性多潜能干细胞向内耳毛细胞和螺旋神经节细胞分化的体外研究[J]. 管利娜,陈燕红,朱恒涛,陈静,江红群.  中华耳鼻咽喉头颈外科杂志. 2014 (08)



本文编号：2958338