铜绿假单胞菌毒性噬菌体PA-YS35的分离鉴定及全基因组序列分析
发布时间：2021-01-15 01:47
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是革兰阴性非发酵需氧菌,普遍分布于泥土,生活用水及医院与工业废水中。作为引起伤口化脓性感染的主要致病菌之一,在机体免疫功能降低时,会引发多种疾病,如术后引起伤口感染,同时也可引发脓肿、褥疮、化脓性中耳炎等疾病。随着多重耐药性的菌株不断地更新换代并生成新的生物膜,临床治疗的难度进一步增大。噬菌体作为生物型治剂,重新走入人们的视线。噬菌体是一种浸染细菌的病毒,其遍及自然界各处。随着耐药性细菌变异速度的加快,噬菌体疗法（Phage Therapy）引起了科研学者们的兴趣及一些科研机构的重视。本实验临床分离得到宿主菌后,采用传统的双层琼脂噬斑法在吉大一院医院废水中分离得到毒性噬菌体,并将其命名为PA-YS35。电镜观察显示,噬菌体PA-YS35属于有尾噬菌体目（Caudovirales Order）、肌尾病毒科（Myoviridae family）噬菌体。生物学特性研究发现:（1）PA-YS35头部呈立体对称、直径约45nm,尾部和头部长度相仿、约为45-50nm;（2）PA-YS35的基因组为双链DNA,限制性内切酶图谱分析表明,基...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基于16SrDNA序列的进化树
图 2.1 基于 16S rDNA 序列的进化树。Fig 2.1 Evolutionary tree based on the 16S rDNA sequence铜绿假单胞菌噬菌体的分离纯化及滴度测定铜绿假单胞菌 YS35 为宿主菌，噬菌体来源于吉大一院废水，如图噬斑形态均为圆形，噬菌体 PA-YS35 可在菌苔上形成噬斑。由图可噬斑变大，并形态单一，更加的清晰透亮。
Fig 2.2 The plaques of Pseudomonas aeruginosa bacteriophages(Figure Ashows the pre-purification plaques,Figure B shows the plaques after the firstpurification,Figure C is the plaque after the second purification,Figure D showthe plaques after the third purification)2.3.3 噬菌体透射电子显微镜观察选取噬菌体 PA-YS35，采用负染法通过透射电子显微镜观察得到噬菌体的图像，如图 2.3 所示，噬菌体由一个立体对称的头部和一条尾巴组成，图 A、B 为噬菌体 PA-YS35，其头部直径约 45-50nm，有一条尾约 50nm。根据国际上对噬菌体的最新分类方法，噬菌体 PA-YS35 属于有尾噬菌体目（Caudovirales Order）肌尾病毒科（Myoviridae family）噬菌体。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014—2017年天津市儿童医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析[J]. 陈朝晖,孙燕燕,肖亚男. 现代药物与临床. 2018(01)
[2]抗菌“新希望”——噬菌体疗法的潜在风险及解决办法探索[J]. 吴毓飞. 中国高新科技. 2017(10)
[3]青枯菌特异性噬菌体的研究进展与应用[J]. 蔡刘体,汪汉成,袁赛飞,刘艳霞,石俊雄. 生物技术通讯. 2012(06)
[4]全国医院感染监控网医院感染病原菌分布及变化趋势[J]. 文细毛,任南,吴安华,徐秀华. 中华医院感染学杂志. 2011(02)
[5]噬菌体治疗研究进展[J]. 王盛,童贻刚. 微生物学通报. 2009(07)
[6]3种非发酵革兰阴性杆菌5年的分离率及耐药趋势回顾[J]. 许宏涛,宣天芝,陶凤荣,张秀珍. 中国临床药理学杂志. 2004(03)
[7]多药耐药铜绿假单胞菌院内感染危险因素及预后因素分析[J]. 曹彬,王辉,朱元珏,陈民钧. 中华结核和呼吸杂志. 2004(01)
硕士论文
[1]屎肠球菌裂解性噬菌体Ec-ZZ2全基因序列的初步分析[D]. 郑辉.吉林大学 2017
[2]鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体LZ35的分离鉴定和全基因组序列分析[D]. 郭钟贺.吉林大学 2017
[3]铜绿假单胞菌PA2800在耐药性和致病性中的作用研究[D]. 魏金花.西北大学 2010
本文编号：2977975
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
基于16SrDNA序列的进化树
图 2.1 基于 16S rDNA 序列的进化树。Fig 2.1 Evolutionary tree based on the 16S rDNA sequence铜绿假单胞菌噬菌体的分离纯化及滴度测定铜绿假单胞菌 YS35 为宿主菌，噬菌体来源于吉大一院废水，如图噬斑形态均为圆形，噬菌体 PA-YS35 可在菌苔上形成噬斑。由图可噬斑变大，并形态单一，更加的清晰透亮。
Fig 2.2 The plaques of Pseudomonas aeruginosa bacteriophages(Figure Ashows the pre-purification plaques,Figure B shows the plaques after the firstpurification,Figure C is the plaque after the second purification,Figure D showthe plaques after the third purification)2.3.3 噬菌体透射电子显微镜观察选取噬菌体 PA-YS35，采用负染法通过透射电子显微镜观察得到噬菌体的图像，如图 2.3 所示，噬菌体由一个立体对称的头部和一条尾巴组成，图 A、B 为噬菌体 PA-YS35，其头部直径约 45-50nm，有一条尾约 50nm。根据国际上对噬菌体的最新分类方法，噬菌体 PA-YS35 属于有尾噬菌体目（Caudovirales Order）肌尾病毒科（Myoviridae family）噬菌体。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2014—2017年天津市儿童医院铜绿假单胞菌的分布及耐药性分析[J]. 陈朝晖,孙燕燕,肖亚男. 现代药物与临床. 2018(01)
[2]抗菌“新希望”——噬菌体疗法的潜在风险及解决办法探索[J]. 吴毓飞. 中国高新科技. 2017(10)
[3]青枯菌特异性噬菌体的研究进展与应用[J]. 蔡刘体,汪汉成,袁赛飞,刘艳霞,石俊雄. 生物技术通讯. 2012(06)
[4]全国医院感染监控网医院感染病原菌分布及变化趋势[J]. 文细毛,任南,吴安华,徐秀华. 中华医院感染学杂志. 2011(02)
[5]噬菌体治疗研究进展[J]. 王盛,童贻刚. 微生物学通报. 2009(07)
[6]3种非发酵革兰阴性杆菌5年的分离率及耐药趋势回顾[J]. 许宏涛,宣天芝,陶凤荣,张秀珍. 中国临床药理学杂志. 2004(03)
[7]多药耐药铜绿假单胞菌院内感染危险因素及预后因素分析[J]. 曹彬,王辉,朱元珏,陈民钧. 中华结核和呼吸杂志. 2004(01)
硕士论文
[1]屎肠球菌裂解性噬菌体Ec-ZZ2全基因序列的初步分析[D]. 郑辉.吉林大学 2017
[2]鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体LZ35的分离鉴定和全基因组序列分析[D]. 郭钟贺.吉林大学 2017
[3]铜绿假单胞菌PA2800在耐药性和致病性中的作用研究[D]. 魏金花.西北大学 2010
本文编号：2977975
本文链接：https://www.wllwen.com/xiyixuelunwen/2977975.html
