MiniSOG蛋白的单克隆抗体制备及初步研究

发布时间：2021-01-25 23:28

　　单线态氧产生者（mini singlet oxygen generator,miniSOG）是改造于拟南芥向光素2蛋白而获得的小分子荧光黄素蛋白,由106个氨基酸残基组成。miniSOG被广泛用于电镜及荧光显微镜,并被广泛用于发色团辅助的光灭活（Chromophore-assisted light inactivation,CALI）蛋白、DNA或RNA,并结合免疫光敏用于癌症的治疗,以及结合细胞消融用于神经科学、免疫生物学等。但是目前国内并无商品化的miniSOG抗体,为了辅助课题研究,制备抗miniSOG蛋白的单克隆抗体,本研究根据miniSOG基因的ORF区序列构建miniSOG-GST重组蛋白的原核表达载体PGEX-4T-1-miniSOG,然后将该重组质粒转化于BL21感受态大肠杆菌中,异丙基硫代半乳糖苷（Isopropylβ-DThiogalactoside,IPTG）诱导融合蛋白的表达,并经亲和层析方法进行纯化。将纯化后的重组蛋白免疫BALB/c小鼠,利用杂交瘤技术制备单克隆抗体。筛选获得稳定分泌抗miniSOG的单克隆抗体细胞株,最终选取性能最优的4F9细胞株进行小鼠腹... 

【文章来源】：病毒学报. 2019,35(06)北大核心

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

pGEX4P1miniSOG的构建及鉴定注：M.DNAMarker；1.阴性对照；


本文编号：3000074