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年龄对小鼠骨髓间充质干细胞调节巨噬细胞极化和功能的影响

发布时间:2021-01-26 02:21
  研究背景:间充质干细胞(MSCs),多呈长梭形,能粘附在塑料表面并形成克隆集落。利用MSCs的增殖分化和再生能力,选择合适的生物材料或细胞因子,可以引导其向神经、骨、软骨等方向的细胞分化,协助参与修复过程。因而,MSCs被广泛认同为组织工程再生的种子细胞。尤其是最早从骨髓内分离出来的骨髓间充质干细胞(BMSCs),性能突出,是该方面的研究热点。近年来研究发现,BMSCs具有免疫调控能力,能够调节局部免疫微环境,提供适合再生的条件。随着对损伤修复过程中免疫反应认识的逐步深入,巨噬细胞作为一种通过调节自身表型参与整个修复过程的免疫细胞,吸引了越来越广泛的关注。BMSCs能够将巨噬细胞(Mφs)诱导为抗炎、促修复的M2表型,进一步促进修复过程的进展。利用不断发展的细胞生物学和细胞治疗技术,BMSCs的免疫调控能力为治疗各种损伤修复及免疫相关疾病带来新的希望。然而,BMSCs的性能受到供体年龄的影响,随着年龄增长,BMSCs增殖、分化、血管形成等性能(体内和体外)随之下降,呈现出衰老状态,极大地影响了其临床应用。另外,往往是老年患者对干细胞治疗的需求最为迫切,因此,年龄是否影响BMSCs的免疫... 

【文章来源】:中国人民解放军空军军医大学陕西省 211工程院校

【文章页数】:68 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

年龄对小鼠骨髓间充质干细胞调节巨噬细胞极化和功能的影响


RAW264.7的细胞形态和鉴定(A.未处理条件下的RAW264.7,标尺:200μm;B.RAW264.7细胞表面标记物鉴定)

不同年龄,小鼠,增殖过程,生长特征


且为贴壁生长,符合 BMSCs 的外形和生长特征(图1-2A)。YMSCs 和 AMSCs 均能在培养皿上增殖。CCK-8 的检测结果表明 7 天增殖过程中,YMSCs 的增殖速度明显高于 AMSCs(图 1-2B)。EdU 检测表明培养 4 天时,YMSCs 细胞组内 EdU 阳性细胞比率明显高于 AMSCs 细胞组(图 1-2C)。图 1-2 不同年龄小鼠 BMSCs 培养和增殖活性检测

分化能力,照片,显微镜下,标尺


空军军医大学硕士学位论文(A. P1 代 YMSCs 和 AMSCs 细胞形态,标尺:100 μm;B. CCK-8 检测下两种细胞生长曲线;C. EdU 染色的 YMSCs 和 AMSCs 细胞和统计分析)3,在相应的诱导条件下,YMSCs 和 AMSCs 能被诱导成骨或是成脂。成骨诱导液诱导 7 天后,YMSCs 和 AMSCs 培养板内均可见矿化结节形成,茜素红染色后大体上可见为红色片/块状,显微镜下表现为细胞之间的红色矿化结节聚集。照片及定量分析发现 YMSCs 成骨能力(形成的矿化结节量)较 AMSCs 更强(P < 0.05)(图 1-3A)。成脂诱导液诱导 7 天后,显微镜可见 YMSCs 和 AMSCs 细胞内明显的橘红色小液滴状的脂滴聚集。异丙醇溶解脂滴并定量结果表明 AMSCs 细胞成脂能力(形成的脂滴的量)较 YMSCs 更强(P < 0.05)(图 1-3B)。


本文编号:3000307

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