MRP8/MRP14诱导腹腔巨噬细胞释放炎性细胞因子

发布时间：2021-01-26 18:19

　　目的探讨MRP8/MRP14诱导小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子表达效应及其作用机制。方法 Luminex x MAP液相芯片系统检测重组MRP8/MRP14蛋白诱导腹腔巨噬细胞6种细胞因子/趋化因子的水平变化;MRP14不同结构域融合蛋白刺激细胞,检测TNF-α、IP-10和IL-6表达;Western blot检测MRP8/MRP14刺激细胞p38 MAPK、JNK和ERK激酶磷酸化变化;细胞预先用p38 MAPKs、JNK、ERK激酶抑制剂、TLR4和RAGE受体拮抗剂预处理,之后给予MRP8/MRP14蛋白刺激,检测TNF-α、IP-10和IL-6表达。结果 MRP8/MRP14能显著诱导TNF-α、IP-10和IL-6的表达,与对照组相比,蛋白表达水平分别升高约98.2、378.6和6.3倍（P<0.01）,MRP8/MRP14不能诱导IL-2、IL-5和IFN-g的表达;MRP14全长及其结构域EFhand-1、EFhand-2及EFhand-1+2融合蛋白能够诱导TNF-α、IP-10和IL-6的表达（P<0.01）,CT末端结构域不具有诱导活性;MRP8/MRP14... 

【文章来源】：南方医科大学学报. 2017,37(09)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 动物和菌株
    1.2 主要试剂
    1.3 主要方法
        1.3.1 重组蛋白的制备
        1.3.2 小鼠腹腔巨噬细胞 （PMs） 的分离、培养
        1.3.3细胞培养上清细胞因子含量测定
        1.3.4 MRP14不同结构域诱导巨噬细胞细胞因子表达的效应
        1.3.5 Western blot检测
        1.3.6 p38 MAPK、JNK和ERK抑制剂对MRP8/MRP14诱导细胞因子表达的影响
        1.3.7 TLR4和RAGE受体抑制剂对MRP8/MRP14诱导细胞因子表达的影响
        1.3.8 统计学方法
2 结果
    2.1 MRP8/MRP14诱导小鼠腹腔巨噬细胞细胞因子的表达
    2.2 MRP蛋白以包含有钙结合手型 （EF-hand） 的结构域具有诱导细胞因子表达的活性
    2.3 MRP8/MRP14刺激小鼠腹腔巨噬细胞p38 MAPK、JNK及ERK激酶的磷酸化变化
    2.4 p38 MAPK、JNK和ERK激酶抑制剂对MRP8/MRP14诱导细胞因子表达的影响
    2.5 TLR4和RAGE受体拮抗剂对MRP8/MRP14诱导细胞因子表达的影响
3 讨论



本文编号：3001596