Hmox1促进BMP9诱导C3H10T1/2细胞向成骨分化

发布时间：2021-02-02 04:06

　　目的:研究血红素加氧酶1（hemeoxygenase 1,Hmox1）在骨形态发生蛋白9（bone morphogenetic proteins 9,BMP9）诱导下间充质干细胞C3H10T1/2向成骨分化过程中发挥的作用。方法:用Ad-BMP9感染C3H10T1/2,分别用Q-PCR和Western blot检测Hmox1mRNA和蛋白水平的变化;Hmox1激动剂COPP处理BMP9诱导的C3H10T1/2细胞,碱性磷酸酶（ALP）染色和活性测定检测早期成骨指标ALP的变化;过表达Hmox1的重组腺病毒（Ad-Hmox1）处理BMP9诱导的C3H10T1/2细胞,ALP染色和活性测定早期成骨指标ALP,茜素红染色检测晚期成骨指标钙盐沉积,Western blot检测成骨相关基因COL1A1。结果:Ad-BMP9感染C3H10T1/2后,Hmox1的mRNA及蛋白水平均升高;BMP9与Hmox1激动剂COPP联用与BMP9组相比ALP的活性增强;Ad-Hmox1可以增强BMP9诱导下C3H10T1/2细胞的ALP活性和钙盐沉积,以及成骨相关基因COL1A1表达。结论:Hmox1可以促进... 

【文章来源】：中国生物工程杂志. 2017,37(04)北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 试剂
    1.3 引物设计
    1.4 质粒构建和细胞实验
        1.4.1 穿梭质粒p Ad Trace-TO4-Hmox1构建
        1.4.2 重组质粒构建和腺病毒包装
        1.4.3 细胞培养
        1.4.4 条件培养基的制备
        1.4.5 Q-PCR
        1.4.6 Western blot
        1.4.7 碱性磷酸酶染色及活性测定
        1.4.8 钙盐沉积实验
    1.5 统计学分析
2 结果
    2.1 BMP9对C3H10T1/2细胞内源性Hmox1表达的影响
    2.2 构建穿梭质粒
    2.3 包装腺病毒
    2.4 Hmox1腺病毒功能验证
    2.5 Hmox1对BMP9诱导的C3H10T1/2早期成骨分化的影响
    2.6 Hmox1对BMP9诱导的C3H10T1/2晚期成骨分化的影响
    2.7 Hmox1对BMP9诱导下C3H10T1/2细胞的成骨指标COL1A1的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]RUNX2对BMP9诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化的影响[J]. 赵艳芳,宋涛,刘跃亮,罗进勇.  中国生物工程杂志. 2013(02)



本文编号：3014018