孤独症模型鼠海马N-酰基乙醇胺相关受体及代谢酶的表达研究

发布时间：2021-02-13 21:11

　　目的检测N-酰基乙醇胺（NAEs）相关受体及其代谢酶在孤独症谱系障碍（ASD）模型鼠海马中的表达,分析NAEs信号与ASD的关联性,为ASD的病因研究提供新的思路。方法以丙戊酸钠（VPA）诱导的ASD模型鼠为研究对象,进行生长发育和行为学检测;采用Western Blot和RT-PCR检测其海马组织中NAEs相关受体,即内源性大麻素受体（CB1R和CB2R）及其代谢酶花生四烯酸磷脂酰乙醇胺特异性磷脂酶D（NAPE-PLD）和酰胺水解酶（FAAH）的蛋白及mRNA表达水平。结果自梳实验、三箱实验及水迷宫实验结果显示:与对照组鼠相比,VPA鼠存在重复的行为模式、社会交互能力障碍及学习、记忆能力障碍;Western Blot结果显示:与对照组鼠相比,VPA鼠海马CB1R与FAAH蛋白表达上调（t=3.033、2.865,P<0.05）,CB2R以及NAPE-PLD蛋白表达在两组大鼠间差异无统计学意义（t=1.034、0.290,P>0.05）,且RT-PCR结果显示:CB1R、CB2R、FAAH和NAPE-PLD的mRNA表达水平在两组大鼠海马中差异均无统计学意义（t=2.239... 

【文章来源】：中国儿童保健杂志. 2020,28(04)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

VPA鼠自梳时间测试结果

CB1R,CB2R,FAAH和NAPE-PLD的mRNA表达水平在两组大鼠海马中的差异无统计学意义(t=2.239、0.747、0.748、0.012,P>0.05)。见图5。3 讨 论

课题组前期采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS/MS)检测外周血中NAEs的水平,采集58名ASD儿童及性别、年龄1∶1匹配的58名正常发育儿童的空腹静脉血,发现ASD儿童NAEs水平明显低于正常儿童。此外,也有一些研究支持ASD与NAEs可能存在关联[8-9]。Siniscalco等[10]对ASD患儿外周血NAEs受体及代谢酶进行了检测,发现CB2R表达在翻译和转录水平均高于对照组儿童,NAPE-PLD mRNA水平低于对照儿童;然而,意大利的一项研究却显示ASD儿童外周NAPE-PLD、CB2R表达上调,FAAH表达降低[11];以上研究均提示NAEs代谢在ASD外周血中存在异常,但结果不尽相同,仍需要通过探究其在中枢系统的表达来进一步验证,因此本研究选用VPA诱导的ASD模型鼠作为研究对象,检测其脑组织中NAEs相关受体及代谢酶的表达情况,为ASD的病因研究提供了新的方向。图4 两组鼠海马组织中CB1R,CB2R,FAAH和NAPE-PLD蛋白相对表达量比较


本文编号：3032586