无菌大鼠的人工培育及生物学特性的测定仙台病毒胶体金免疫层析方法的建立
发布时间：2021-02-14 02:50
大鼠是目前应用非常广泛的实验动物,而无菌大鼠由于排除了微生物的影响,作为实验工具有其独特的优势。随着对实验动物质量的要求越来越高,本土化无菌大鼠的大规模使用成为一种趋势。针对这种趋势,我们在前人的工作基础上,改进条件,成功培育了无菌大鼠,并对其生物学特性进行了测定。实验中对2只怀孕大鼠进行了子宫摘除术,共得到大鼠胎儿36只,离乳18只,成活率为50%。2月龄后,将性成熟的FO代无菌大鼠进行兄妹间的交配,得到F1代无菌大鼠；同样的方法得到F2代无菌大鼠。分别对5周龄、8周龄的无菌大鼠取血和脏器测定血常规、血生化、凝血酶原时间、免疫指标和脏器系数。这些指标将会为无菌大鼠的推广应用提供良好的基础数据。仙台病毒是呼吸道病毒,是引起啮齿类动物呼吸道疾病的主要病原,也是清洁级以上实验动物必须排除的病原菌。目前检测仙台病毒的方法有很多,本试验旨在建立一种特异、敏感、快速的胶体金免疫层析检测法。我们采用鸡胚培养获得含有仙台病毒的尿囊液,超速离心后制成仙台病毒抗原,备用。采用鞣酸-柠檬酸钠还原法制得10nm、16nm大小的胶体金颗粒,分别标记小鼠二抗和大鼠二抗。金标抗体制成以后组装试纸条：硝酸纤维素膜上...
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
怀孕的无菌大鼠Fig.4Pregnantgermfreerats
图8母鼠哺乳和人工哺乳无菌大鼠的体重变化Fig.8ComParisonofweightgrowingbetweengermfreerats6血液数值的测定结果6.1血常规6.1.15周龄F1代和FZ代无菌大鼠血常规的测定数值表155周龄Fl和F2代无菌大鼠血常规的数值Tab.15ResultsofroutinebloodtestinFIandFZgermfreeratsaged5weeks测定项目(Index)WBCRBC雌性(female)F1FZ7.27士0.386.78士0.226一41士0.126.60士0.09139.55士2.16141.55士1.560.44士0.010.41士0.0069.35士0.5661.75士0.30雄性(male)F1FZ7.18士0.557.42士0.456.27士0.086.02士0.09137.60士1.91131.10士1.570.44士0.010.37士0.0170.15士0.5862.05士0.44
图1鸡胚接毒示意图Fig.1Sehematiediagramofchiekenembryo，于气室接近胚位处以碘配和酒精进行消头沿此小孔插入0.5一1.ocm(避开血管)，注入灯外焰烤化后密封小孔，置孵卵箱中孵育一次。24小时内死亡的鸡胚，认为是非特全柜内以无菌手续收取鸡胚尿囊液。收毒放置2小时，使鸡胚血管收缩，血液凝固。以无菌操作小心拨开石蜡片，以镊子缓用针头尖小心划破气室膜。以无菌镊子拨要吸到囊膜和血液。用一次性巧ml离心管液。RA)存于阿氏溶液中。红细胞3次，然后用生理盐水调整红细胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]无菌豚鼠与普通豚鼠血液学参数的比较[J]. 张琨,孙淑华,仉慧敏,胡小燕,王艳荣,孟金萍,刘云波. 中国实验动物学报. 2010(02)
[2]不同日龄SPF级Wistar大鼠血液生化参考值的建立[J]. 吴晓燕,王冬平,贺栎,尚世臣,孙岩松,李桂军,凡秀. 中国比较医学杂志. 2008(07)
[3]SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较[J]. 李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波. 中国比较医学杂志. 2008(04)
[4]动态调节人工乳粘稠度和营养成分饲喂无菌大鼠效果研究[J]. 王建国,李兰娟,卢领群,萨晓婴,戴方伟. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2007(03)
[5]性别、年龄对SPF级近交系Wistar大鼠血常规值的影响[J]. 王刚,黄小琼,邝少松,许竞辉,赵士海,夏冠玲. 中国比较医学杂志. 2007(03)
[6]柯萨奇病毒IgM抗体胶体金免疫层析快速诊断试纸条的研制[J]. 张宝元,崔小岱,马晓红,张霆,呼守生. 中华实验和临床病毒学杂志. 2006(03)
[7]普通级、SPF级SD、Wistar大鼠血液生化常值的测定与比较[J]. 詹纯列,肖育华,李新春,杨传红,赖晃文,王捷. 中国比较医学杂志. 2004(02)
[8]不同周龄SPF级Wistar大鼠血常规值、主要脏器重量系数及体重、体尺的测定[J]. 杨斐,顾祖曦,施映霞,胡樱,冷伟民. 实验动物科学与管理. 2003(04)
[9]仙台病毒[J]. 姜骞. 畜牧兽医科技信息. 2003(12)
[10]免疫酶和胶体金技术在包虫病诊断中的应用[J]. 秦小平. 临床和实验医学杂志. 2002(01)
本文编号：3032994
【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章页数】：64 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
怀孕的无菌大鼠Fig.4Pregnantgermfreerats
图8母鼠哺乳和人工哺乳无菌大鼠的体重变化Fig.8ComParisonofweightgrowingbetweengermfreerats6血液数值的测定结果6.1血常规6.1.15周龄F1代和FZ代无菌大鼠血常规的测定数值表155周龄Fl和F2代无菌大鼠血常规的数值Tab.15ResultsofroutinebloodtestinFIandFZgermfreeratsaged5weeks测定项目(Index)WBCRBC雌性(female)F1FZ7.27士0.386.78士0.226一41士0.126.60士0.09139.55士2.16141.55士1.560.44士0.010.41士0.0069.35士0.5661.75士0.30雄性(male)F1FZ7.18士0.557.42士0.456.27士0.086.02士0.09137.60士1.91131.10士1.570.44士0.010.37士0.0170.15士0.5862.05士0.44
图1鸡胚接毒示意图Fig.1Sehematiediagramofchiekenembryo，于气室接近胚位处以碘配和酒精进行消头沿此小孔插入0.5一1.ocm(避开血管)，注入灯外焰烤化后密封小孔，置孵卵箱中孵育一次。24小时内死亡的鸡胚，认为是非特全柜内以无菌手续收取鸡胚尿囊液。收毒放置2小时，使鸡胚血管收缩，血液凝固。以无菌操作小心拨开石蜡片，以镊子缓用针头尖小心划破气室膜。以无菌镊子拨要吸到囊膜和血液。用一次性巧ml离心管液。RA)存于阿氏溶液中。红细胞3次，然后用生理盐水调整红细胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]无菌豚鼠与普通豚鼠血液学参数的比较[J]. 张琨,孙淑华,仉慧敏,胡小燕,王艳荣,孟金萍,刘云波. 中国实验动物学报. 2010(02)
[2]不同日龄SPF级Wistar大鼠血液生化参考值的建立[J]. 吴晓燕,王冬平,贺栎,尚世臣,孙岩松,李桂军,凡秀. 中国比较医学杂志. 2008(07)
[3]SPF级与普通级新西兰兔血液学参数的比较[J]. 李增强,孙淑华,孟金萍,王艳蓉,杨旭,张琨,刘云波. 中国比较医学杂志. 2008(04)
[4]动态调节人工乳粘稠度和营养成分饲喂无菌大鼠效果研究[J]. 王建国,李兰娟,卢领群,萨晓婴,戴方伟. 浙江大学学报(农业与生命科学版). 2007(03)
[5]性别、年龄对SPF级近交系Wistar大鼠血常规值的影响[J]. 王刚,黄小琼,邝少松,许竞辉,赵士海,夏冠玲. 中国比较医学杂志. 2007(03)
[6]柯萨奇病毒IgM抗体胶体金免疫层析快速诊断试纸条的研制[J]. 张宝元,崔小岱,马晓红,张霆,呼守生. 中华实验和临床病毒学杂志. 2006(03)
[7]普通级、SPF级SD、Wistar大鼠血液生化常值的测定与比较[J]. 詹纯列,肖育华,李新春,杨传红,赖晃文,王捷. 中国比较医学杂志. 2004(02)
[8]不同周龄SPF级Wistar大鼠血常规值、主要脏器重量系数及体重、体尺的测定[J]. 杨斐,顾祖曦,施映霞,胡樱,冷伟民. 实验动物科学与管理. 2003(04)
[9]仙台病毒[J]. 姜骞. 畜牧兽医科技信息. 2003(12)
[10]免疫酶和胶体金技术在包虫病诊断中的应用[J]. 秦小平. 临床和实验医学杂志. 2002(01)
本文编号：3032994
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