小鼠梗阻性黄疸及胆汁内外引流动物模型的建立及各组肝脏组织中胆汁酸受体TGR5的表达研究

发布时间：2017-04-13 19:10

  本文关键词：小鼠梗阻性黄疸及胆汁内外引流动物模型的建立及各组肝脏组织中胆汁酸受体TGR5的表达研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景及目的：黄疸是临床上常见的体征之一,梗黄发生时可通过引起机体的内环境变化导致机体免疫状态改变,肠道免疫功能异常,严重营养不良,凝血异常,甚至心功能不全,肾、肝脏功能损伤等身体器官的损害。对于一些需要手术治疗的梗黄患者,在术前减黄的方式的选择目前尚存在争议。同时有研究发现胆汁酸受体TGR5在肝脏炎性反应过程中起到一定的调节作用。本研究尝试探索建立小鼠的梗阻性黄疸及胆汁内、外引流模型。并对梗阻性黄疸及胆汁内外引流术后的小鼠肝脏内TGR5的表达情况进行了初步研究,探讨其是否参与并调节这一过程的病理生理变化。材料与方法：为了探索建立小鼠模型,本研究采用雄性昆明小鼠153只,随机分为假手术组(SH),梗阻性黄疸组(OJ),胆汁外引流组(ED)及胆汁内引流组(ID)四组。参考大鼠建模方法,重新改进并建立小鼠动物模型。第一次手术建立SH组和OJ组,第二次手术在梗黄后第五天实施,OJ及SH组在第一次手术后第五天采集血液和肝脏组织标本ID及ED组于第二次手术后第五天采集。为了确定建模是否成功并探索TGR5是否参与梗阻性黄疸及胆汁引流过程中肝脏炎症调节。将血液样本送检验科检测生化指标,对收集的肝脏组织一部分行HE染色,另一部分行Real-time PCR及Western blot检测肝脏中TGR5 mRNA及蛋白水平的表达情况。结果：本研究成功建立了小鼠梗阻性黄疸及胆汁内、外引流术的动物模型。在对各组肝脏组织进行HE染色,血样进行生化检测后发现SH组肝脏组织形态及生化指标上均未见明显异常,而OJ组肝组织内可发现肝纤维化、水肿变性及炎症坏死等改变,生化指标提示胆红素升高肝功能异常。在行ED和ID治疗后可不同程度的改善肝脏损伤,且生化指标趋于正常。提示梗黄及引流模型可靠有效。在mRNA和蛋白水平对各组TGR5表达情况进行检测显示：OJ组TGR5 mRNA表达水平较SH组上调1.3倍(P=0.005)；ED组及ID组中,TGR5 mRNA表达水平较OJ组明显下调(P0.05),与SH组相比无明显差异。但不同引流方式对TGR5mRNA表达水平无明显影响。蛋白水平检测结果与mRNA检测结果一致,提示与SH组相比,梗阻性黄疸时肝脏TGR5的表达水平明显上调,经引流后TGR5表达水平基本恢复正常,但内、外引流的手术方式对TGR5的表达水平无明显影响。结论：本研究成功建立小鼠的梗阻性黄疸及胆汁内、外引流模型。梗阻性黄疽小鼠肝脏组织内TGR5表达明显增高,胆汁引流术可逆转这一改变。提示在梗阻性黄疸发生后肝脏损伤及胆汁引流术后肝脏修复炎症消退的过程可能与TGR5表达调控有关。
【关键词】：梗阻性黄疸 肝脏 胆汁引流术 TGR5
【学位授予单位】：中国人民解放军医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R575;R-332
【目录】：

• 缩略词表6-7
• 中文摘要7-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-13
• 实验材料13-16
• 1. 动物13
• 2. 手术器械及耗材13
• 3. 实验设备、试剂及耗材13-16
• 实验方法16-26
• 1. 动物麻醉16
• 2. 手术及分组16-19
• 3. 标本采集及检测19-21
• 4. 各组间肝脏组织中TGR5 MRNA的测定21-24
• 5. 各组间肝脏组织中TGR5蛋白水平上的测定24-25
• 6. 统计学方法25-26
• 结果26-31
• 1. 动物术后基本情况分析26
• 2. 各组小鼠肝脏组织HE染色结果分析26-27
• 3. 各组小鼠术后化验结果情况27-28
• 4. 各组间肝脏组织中TGR5表达的检测结果28-31
• 讨论31-34
• 结论34-35
• 参考文献35-39
• 综述：梗阻性黄疸检查方法的综述39-46
• 参考文献43-46
• 攻读期间学位期间发表文章情况46-47
• 致谢47

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 Zi-Kai Wang;Jian-Guo Xiao;Xue-Fei Huang;Yi-Chun Gong;Wen Li;;Effect of biliary drainage on inducible nitric oxide synthase, CD14 and TGR5 expression in obstructive jaundice rats[J];World Journal of Gastroenterology;2013年15期

  本文关键词：小鼠梗阻性黄疸及胆汁内外引流动物模型的建立及各组肝脏组织中胆汁酸受体TGR5的表达研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：304270