幽门螺杆菌CagA蛋白调控α-烯醇酶表达的机制
发布时间：2021-02-23 18:43
幽门螺杆菌（Helicobacterpylori, H. pylori）是一种微需氧有鞭毛的螺旋型革兰氏阴性菌,1982年由Marshall和Warren在人体胃中首次发现。H. pylori的全球人群感染率超过50%,在发展中国家感染率更高。H. pylori的感染是慢性胃炎、胃溃疡等发生的重要危险因素,也与胃癌的发生关系密切,胃癌的死亡率在肿瘤相关疾病死亡率中居第二位。H. pylori致病因子众多,其中与肿瘤发生关系最密切的是细胞毒素相关基因致病岛（cytotoxin-associated gene pathogenicity island, cagPAI）,在一半的西方型菌株和90%的东亚型菌株中均携带cagPAI9。cagPAI中编码120-140kDa大小的CagA蛋白与胃癌的发生有密切关系。为了阐明CagA蛋白在H. pylori感染导致胃癌的致病机制中的作用,本课题组构建了一株cagA基因敲除的突变菌株HP27CcagA-);经过HP27（cagA-）突变株和野生菌HP27（cagA+）分别感染胃上皮细胞,利用双向电泳和质谱分析筛选两组细菌感染引起的宿主细胞总蛋白的差异...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
pMD19-T质粒图谱
图2 pcDNA3.1+质粒图谱Fig 2 The map of pcDlMA3.1 vector(1)郑州大学公共卫生学院张巧教授惠赠PCDNA3.1+真核的细菌接种于含Amp (100 |xg/mL)的LB固体平板，置于37养后挑取单克隆菌落接种于5 mL的LB液体培养基（A), 37 °C, 220 r/min培养过夜后，按照2.3.7.2碱裂解法提粒送深圳华大基因公司利用通用引物测序，测序结果与GenA3.1+基因进行BLAST对比。对鉴定过的质粒保种后存于-8(2) pcDNA3.1 +质粒图谱（图2)6. 2 cad基因及表达载体pcDNA3. 1+质粒的双酶切(1)分别过夜培养10 mL含pMD19-T-ci/gJ和pcDNA3.1+5a,条件 37。C, 220 r/min；(2)利用碱裂解法中量提取pMD19-T-?/gJ和PCDNA3.1+质(3)取质粒 pMD19-T-cagJ 和 PCDNA3.1+ 用限制性内切酶
图3 cagA基因PCR扩增产物Fig 3 PCR production of cagA gene2，3： PCR production of cagA gene； 4: 1 Kb DN A LadderA 测序结果中提取质粒pMD19-T-cag儿送深圳华大基因测序，cagJ基因测序结果输入数据库用BLAST对比，结和kozak序列外，其他基因序列同Genbank上登因完全-?致，Genbank登录号DQ306710 (图4，5 )。42
【参考文献】：
期刊论文
[1]烯醇化酶1的生物学功能[J]. 姜冬梅,康波,马容,何珲. 动物营养学报. 2014(01)
[2]癌蛋白CagA、ERK信号通路与胃癌关系的研究进展[J]. 邢军明,黄志刚. 世界华人消化杂志. 2013(31)
[3]MicroRNA与胃癌相关性的研究进展[J]. 刘皓,范尧夫,魏睦新. 世界华人消化杂志. 2013(23)
[4]Predominant mucosal IL-8 mRNA expression in non-cagA Thais is risk for gastric cancer[J]. Sirikan Yamada,Shunji Kato,Takeshi Matsuhisa,Luksana Makonkawkeyoon,Masaru Yoshida,Thiraphat Chakrabandhu,Nirush Lertprasertsuk,Pawit Suttharat,Bandhuphat Chakrabandhu,Shin Nishiumi,Wilaiwan Chongraksut,Takeshi Azuma. World Journal of Gastroenterology. 2013(19)
[5]Evaluation of the relationship between dietary factors,CagA-positive Helicobacter pylori infection,and RUNX3 promoter hypermethylation in gastric cancer tissue[J]. Yan-Wei Zhang,Sang-Yong Eom,Dong-Hyuk Yim,Young-Jin Song,Hyo-Yung Yun,Joo-Seung Park,Sei-Jin Youn,Byung-Sik Kim,Yong-Dae Kim,Heon Kim. World Journal of Gastroenterology. 2013(11)
[6]幽门螺杆菌提取液诱导胃上皮细胞蛋白质组变化[J]. 黄学文,赵琪,罗瑞华,黄丽丽,安仙园,赵兰静. 中华医院感染学杂志. 2011(19)
[7]胃癌组织中烯醇化酶-α和肿瘤型丙酮酸激酶蛋白的表达及其临床意义[J]. 倪田根,高晨,周欣,王娜,曾峰,关泉林. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2011(05)
[8]蒙古沙土鼠不同幽门螺杆菌菌株感染相关性胃病的研究进展[J]. 柳云恩,袁媛. 世界华人消化杂志. 2011(23)
[9]宿主基因单核苷酸多态性与幽门螺杆菌相关胃癌[J]. 何彩云,袁媛. 遗传. 2011(02)
[10]幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响[J]. 马一君,段广才,张荣光,张卫东,郗园林. 第三军医大学学报. 2010(19)
博士论文
[1]1、FoxM1在幽门螺杆菌相关胃癌中的作用及其机制 2、miR-146a在吗啡诱导细胞凋亡中的作用及其机制[D]. 冯一民.山东大学 2013
[2]幽门螺杆菌CagA抑制胃上皮细胞自噬及其感染引起的miR-222/146a上调在胃相关疾病发生中的作用机制研究[D]. 李娜.第三军医大学 2013
[3]幽门螺杆菌cag致病岛cagI基因功能的研究[D]. 王华.江苏大学 2011
[4]幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）致病的分子机制研究[D]. 黄志刚.郑州大学 2007
硕士论文
[1]应用蛋白质组学技术筛选胃癌细胞差异表达蛋白[D]. 孙晓宇.泰山医学院 2012
[2]CD44与糖酵解相关分子在胃癌中的表达及意义[D]. 高晨.兰州大学 2011
本文编号：3048051
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：144 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
pMD19-T质粒图谱
图2 pcDNA3.1+质粒图谱Fig 2 The map of pcDlMA3.1 vector(1)郑州大学公共卫生学院张巧教授惠赠PCDNA3.1+真核的细菌接种于含Amp (100 |xg/mL)的LB固体平板，置于37养后挑取单克隆菌落接种于5 mL的LB液体培养基（A), 37 °C, 220 r/min培养过夜后，按照2.3.7.2碱裂解法提粒送深圳华大基因公司利用通用引物测序，测序结果与GenA3.1+基因进行BLAST对比。对鉴定过的质粒保种后存于-8(2) pcDNA3.1 +质粒图谱（图2)6. 2 cad基因及表达载体pcDNA3. 1+质粒的双酶切(1)分别过夜培养10 mL含pMD19-T-ci/gJ和pcDNA3.1+5a,条件 37。C, 220 r/min；(2)利用碱裂解法中量提取pMD19-T-?/gJ和PCDNA3.1+质(3)取质粒 pMD19-T-cagJ 和 PCDNA3.1+ 用限制性内切酶
图3 cagA基因PCR扩增产物Fig 3 PCR production of cagA gene2，3： PCR production of cagA gene； 4: 1 Kb DN A LadderA 测序结果中提取质粒pMD19-T-cag儿送深圳华大基因测序，cagJ基因测序结果输入数据库用BLAST对比，结和kozak序列外，其他基因序列同Genbank上登因完全-?致，Genbank登录号DQ306710 (图4，5 )。42
【参考文献】：
期刊论文
[1]烯醇化酶1的生物学功能[J]. 姜冬梅,康波,马容,何珲. 动物营养学报. 2014(01)
[2]癌蛋白CagA、ERK信号通路与胃癌关系的研究进展[J]. 邢军明,黄志刚. 世界华人消化杂志. 2013(31)
[3]MicroRNA与胃癌相关性的研究进展[J]. 刘皓,范尧夫,魏睦新. 世界华人消化杂志. 2013(23)
[4]Predominant mucosal IL-8 mRNA expression in non-cagA Thais is risk for gastric cancer[J]. Sirikan Yamada,Shunji Kato,Takeshi Matsuhisa,Luksana Makonkawkeyoon,Masaru Yoshida,Thiraphat Chakrabandhu,Nirush Lertprasertsuk,Pawit Suttharat,Bandhuphat Chakrabandhu,Shin Nishiumi,Wilaiwan Chongraksut,Takeshi Azuma. World Journal of Gastroenterology. 2013(19)
[5]Evaluation of the relationship between dietary factors,CagA-positive Helicobacter pylori infection,and RUNX3 promoter hypermethylation in gastric cancer tissue[J]. Yan-Wei Zhang,Sang-Yong Eom,Dong-Hyuk Yim,Young-Jin Song,Hyo-Yung Yun,Joo-Seung Park,Sei-Jin Youn,Byung-Sik Kim,Yong-Dae Kim,Heon Kim. World Journal of Gastroenterology. 2013(11)
[6]幽门螺杆菌提取液诱导胃上皮细胞蛋白质组变化[J]. 黄学文,赵琪,罗瑞华,黄丽丽,安仙园,赵兰静. 中华医院感染学杂志. 2011(19)
[7]胃癌组织中烯醇化酶-α和肿瘤型丙酮酸激酶蛋白的表达及其临床意义[J]. 倪田根,高晨,周欣,王娜,曾峰,关泉林. 中国肿瘤生物治疗杂志. 2011(05)
[8]蒙古沙土鼠不同幽门螺杆菌菌株感染相关性胃病的研究进展[J]. 柳云恩,袁媛. 世界华人消化杂志. 2011(23)
[9]宿主基因单核苷酸多态性与幽门螺杆菌相关胃癌[J]. 何彩云,袁媛. 遗传. 2011(02)
[10]幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响[J]. 马一君,段广才,张荣光,张卫东,郗园林. 第三军医大学学报. 2010(19)
博士论文
[1]1、FoxM1在幽门螺杆菌相关胃癌中的作用及其机制 2、miR-146a在吗啡诱导细胞凋亡中的作用及其机制[D]. 冯一民.山东大学 2013
[2]幽门螺杆菌CagA抑制胃上皮细胞自噬及其感染引起的miR-222/146a上调在胃相关疾病发生中的作用机制研究[D]. 李娜.第三军医大学 2013
[3]幽门螺杆菌cag致病岛cagI基因功能的研究[D]. 王华.江苏大学 2011
[4]幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白（CagA）致病的分子机制研究[D]. 黄志刚.郑州大学 2007
硕士论文
[1]应用蛋白质组学技术筛选胃癌细胞差异表达蛋白[D]. 孙晓宇.泰山医学院 2012
[2]CD44与糖酵解相关分子在胃癌中的表达及意义[D]. 高晨.兰州大学 2011
本文编号：3048051
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