TLR4在铜绿假单胞菌上清液诱导RAW264.7巨噬细胞凋亡中的作用

发布时间：2021-04-03 18:42

　　目的研究Toll样受体4（TLR4）在铜绿假单胞菌（Pseudomonase aeruginosa,PA）上清液诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7凋亡中的作用。方法 RAW264.7巨噬细胞分为control组（不做任何处理）、MOD组（体积分数为0.10、0.20、0.30的PA上清液处理）、control+TAK-242组（TLR4阻断剂处理）、MOD+TAK-242组（体积分数为0.10、0.20、0.30的PA上清液处理+TLR4阻断剂处理）,采用Hoechst染色法观察细胞凋亡后细胞核形态学变化,MTT检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测TLR4蛋白的表达。结果与control组相比,MOD组呈现不同程度的细胞凋亡（P<0.05）,且随着PA上清液体积分数的逐渐增加,细胞凋亡率不同程度逐渐增加（P<0.05）;加入TLR4阻断剂后,细胞凋亡率比MOD组明显降低（P<0.05）。同时随着PA上清液体积分数逐渐增加,TLR4蛋白的表达不同程度逐渐增加（P<0.05）;加入TLR4阻断剂后,TLR4蛋白的表达水平降低（P... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2019,35(11)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验细胞
    1.2 实验菌株
    1.3 实验主要试剂及仪器
    1.4 细胞培养
    1.5 PA上清液的制备
    1.6 实验分组
    1.7 Hoechst染色法观察RAW264.7巨噬细胞凋亡后细胞核染色质形态变化
    1.8 MTT法观察各组细胞在不同作用时间下增殖情况
    1.9 流式细胞术检测细胞凋亡
    1.1 0 Western blot检测TLR4蛋白表达情况
    1.1 1 统计学分析
2 结果
    2.1 RAW264.7巨噬细胞凋亡后细胞核染色质形态变化
    2.2 MTT法检测阻断TLR4与不阻断TLR4各组细胞的增殖抑制率
    2.3 Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测阻断TLR4与不阻断TLR4各组细胞的凋亡率
    2.4 Western blot检测阻断TLR4与不阻断TLR4各组TLR4蛋白表达情况
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中Fas蛋白的表达[J]. 孟子卜,柴文戍.  中国药理学通报. 2012(01)
[2]铜绿假单胞菌上清液诱导J774细胞凋亡过程中凋亡诱导因子的表达[J]. 李颖,柴文戍,刘砚,宁学聪.  山东医药. 2010(41)



本文编号：3116875