柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β，IL-6基因表达的影响

发布时间：2017-04-23 15:00

  本文关键词：柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β，IL-6基因表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景癫痫是神经系统的常见疾病,是由多种原因导致的脑部神经元高度同步化异常放电的临床综合征,具有发作性、短暂性、重复性和刻板性的特点。其发作时的临床表现包括运动、感觉、意识、精神、行为及自主功能异常等多个方面。癫痫长期反复发作不仅损害患者身体,影响患者生活质量,而且可导致一系列精神心理问题,给社会及家庭造成非常沉重的负担。抑郁症是一种常见的心境障碍,以显著而持久的心境低落为主要临床特征,.包括兴趣缺乏,活动减少,疲乏无力,思维迟缓,注意力不集中,遇事犹豫不决,自我评价过低,认为自己无用、无助和无价值,常有自责,自罪,反复出现想死的念头或有自杀行为,食欲减退或增加,体重减轻或增加,失眠或睡眠过多等。抑郁症的病因到目前为止仍不清楚,多因素联合作用可能是抑郁症发生的原因,生物因素构成发病倾向或基本素质,心理社会因素起到触发作用。癫痫合并抑郁临床常见,早期西医对癫痫-抑郁共病的研究报道较少,治疗手段更是相当有限,但近年来对癫痫患者伴发抑郁的研究已成为临床和基础研究的热点。有文献报道癫痫合并抑郁的发生率在9%-62%之间。癫痫患者抑郁的发生率显著高于普通人群。最新的一项对参加了9项研究的29891名癫痫患者进行的meta分析表明,这些受试者当中癫痫合并抑郁的发生率为23.1%。癫痫合并的精神障碍,尤其是抑郁症,是影响患者生活质量的重要因素。抑郁症可贯穿癫痫整个病理过程,不仅影响癫痫患者的生活质量,导致癫痫反复发作,而且增加癫痫患者的自杀风险。抑郁是颞叶癫痫患者及内侧颢叶硬化患者术后1年再发加重的预警因素,合并抑郁症的癫痫患者发生耐药或发展为难治性癫痫的风险较无抑郁症者高2.2倍,而且其手术治疗失败率也更高。据统计,抑郁在额、颞叶癫痫患者中多发,尤其多见于颞叶复杂部分性发作的患者。所以探讨癫痫合并抑郁的发生机制,采取积极有效的措施防治癫痫-抑郁共病具有重要意义。慢性颞叶癫痫可出现血清皮质醇浓度增加,促炎细胞因子白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)等的表达上调,导致5-HT轴失衡,进而导致海马五羟色胺(5-HT)含量减少,使5-HT1A受体的表达下调,最终导致癫痫合并抑郁。5-HT轴功能异常可能使下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)失调,进而激活细胞因子白介IL-1β,IL-6信号通路从而影响癫痫。一些研究表明某些抗癫痫药物可以引起抑郁等精神障碍,甚至导致癫痫患者自杀。另有研究表明某些抗抑郁药物的使用可诱发加重癫痫。癫痫-抑郁共病临床常见,西医联合使用抗癫痫与抗抑郁药治疗癫痫-抑郁共病存在一定矛盾及风险,而中医临床“从肝论治”运用柴胡疏肝汤治疗癫痫-抑郁共病取得了满意疗效,中医药副作用小,毒性反应轻,而且相对临床常用的抗癫痫及抗抑郁药价格低,患者耐受性好,因此临床应用中医中药治疗癫痫-抑郁共病,探讨中药的作用机制具有重要意义。目前就中医中药对癫痫-抑郁共病模型大鼠海马中5-HT含量及1L-1 β、IL-6mRNA表达的影响的研究报道较少。本文旨在通过建立癫痫-抑郁共病大鼠模型,探讨柴胡疏肝汤对模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β, IL-6 mRNA表达的影响,探讨其可能的作用机制,从而为临床治疗癫痫-抑郁共病提供实验依据。癫痫属中医“痫病”范畴,抑郁症属中医“郁病”范畴,我国历代医家在临床实践中很早就发现癫痫患者常伴情志失调之表现,而情志失调往往又以抑郁、焦虑等“肝证”相关的症候表现为主。广东省名中医谢炜教授结合临床及古代医家学术思想,提出“从肝论治”是治疗癫痫-抑郁共病的关键；并且运用“柴胡疏肝汤”在临床治疗癫痫合并抑郁过程中取得了良好效果。柴胡疏肝汤是以柴胡桂枝汤为底方,再配入四物汤,合用生龙骨,生牡蛎、钩藤组成。方中运用柴胡桂枝汤疏肝解郁,理气化痰,四物汤养肝、柔肝,生龙牡、钩藤等镇肝潜阳,平息肝风,诸药合用,共凑疏肝养肝,柔肝平肝,镇肝潜阳之效。然而柴胡疏肝汤治疗癫痫-抑郁共病的作用机制尚未明了,因此借助实验动物建立能够模拟人类癫痫合并抑郁的癫痫-抑郁共病动物模型,探讨柴胡疏肝汤的可能作用机制具有非常现实的意义。目前慢性颞叶癫痫-抑郁共病大鼠模型已得到世界公认,其原因主要包括：(1)迄今为止,有关锂-匹罗卡品慢性颢叶癫痫-抑郁共病模型的研究较多；(2)一些研究者认为“因素-应激”是癫痫-抑郁共病发生的机制之一,而该动物模型符合“因素-应激模型”；(3)据统计,颞叶癫痫在临床中最为常见。额、颞叶癫痫患者,尤其是颞叶复杂部分性发作的患者易患抑郁；额叶、颞叶癫痫患者的SPECT、PET、EEG等检查结果大部分与抑郁患者相似。采用SPECT检测抑郁患者皮层(颞叶和额叶),大多显示其灌注量减少；检测额、颞叶癫痫患者相应的脑叶,发现其灌流量增加。上述检查结果提示,额、颞叶癫痫反复发作及脑区功能异常与癫痫合并抑郁的发生密切相关,而锂-匹罗卡品慢性癫痫模型已被证实是一种TLE模型,因此本课题组选用该模型符合转化医学精神；(4)有关癫痫-抑郁共病的国家自然科学基金项目的申请者之前的研究工作也是基于这个模型,并且通过实验验证了该模型具有可操作性,之前的实验结果表明慢性颞叶癫痫能发展为与抑郁共病,因此运用此模型开展的各项后续研究具有继承性。因此,本课题组通过建立锂-匹罗卡品慢性颞叶癫痫抑-郁共病大鼠模型,观察柴胡疏肝汤对模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β, IL-6 mRNA表达的影响,探讨柴胡疏肝汤的可能作用机制。目的本实验基于“从肝论治”的理论基础治疗癫痫-抑郁共病及抑制促炎因子表达对5-HT轴的影响,通过观察柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β,IL-6 mRNA表达的影响,探讨柴胡柴胡疏肝汤治疗癫痫-抑郁共病的可能作用机制,为癫痫-抑郁共病“从肝论治”的中医理论提供实验依据。方法1建模、分组、给药及相关指标检测方法先用75%乙醇消毒大鼠腹部注射部位,然后腹腔注射氯化锂(130mg. kg',溶于去离子水,注射容量为1mL. kg-1),24h后腹腔注射盐酸匹罗卡品(40mg. kg-1,溶于0.9%氯化钠注射液,注射容量为1mL. kg-1),诱发大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE)。注射匹罗卡品10-15min后,可观察到大鼠出现持续的痫性发作。按照Racine J分级标准,发作程度达4、5级且持续时间2小时以上的大鼠可通过筛选进入下一步试验；为减轻痫性发作,降低大鼠死亡率,分别于痫性发作后3h和8h腹腔注射地西泮(5mg.kg-1,溶于0.9%氯化钠注射液,注射容量为2mL.kg-1)和苯妥英钠(50mg.kg-1,溶于0.1M NaOH,注射容量为1mL. kg-1)终止SE。经过连续8周的观察,筛选出制作成功的癫痫-抑郁共病模型,并将其随机分为模型组,西酞普兰组,柴胡疏肝汤高、中、低剂量组。正常组10只。药物干预组分别给予西酞普兰10 mg.kg-1.d-1,柴胡疏肝汤高、中、低剂量10,5,2.5 g. kg-1.d-1,正常组与模型组对应给予等量生理盐水ig,连续4周,2次/d。通过强迫游泳(FST)和蔗糖消耗实验评估抑郁行为的变化；视频录像监测大鼠痫性发作次数；液相色谱-质谱法检测海马5-HT的含量；实时荧光定量PCR检测海马IL-1β,IL-6 mRNA的表达量。2统计学方法运用SPSS13.0统计软件包,计量资料用x±s表示,模型筛选采用配对t检验。各组之间的比较采用单因素方差分析(One—way ANOVA)进行统计处理,大鼠痫性发作次数采用单个重复测量的方差分析进行统计处理,P0.05表示具有统计学意义,P0.01表示有显著统计学意义。结果1.正常组与模型组比较,各监测指标变化与正常组比较,模型组大鼠强迫游泳累计不动时间明显延长,糖水消耗量明显减少,IL-1β mRNA表达明显增加(P0.01)；5-HT含量减少,IL-6 mRNA表达增加(P0.05)。2.药物干预4周后模型大鼠抑郁行为的变化与模型组比较,药物干预4周后,西酞普兰,柴胡疏肝汤高,中剂量组FST累计不动时间明显缩短,糖水消耗量明显增加(P0.01)；西酞普兰,柴胡疏肝汤高,中剂量组与柴胡疏肝汤低剂量组比较,有统计学意义(P0.01)。与干预前比较,药物干预后各指标变化有统计学意义(P0.05)。西酞普兰组与柴胡疏肝汤高、中剂量组比较无统计学意义(P0.05)。3.药物干预4周后模型大鼠痫性发作次数的变化与模型组比较,药物干预4周后,西酞普兰,柴胡疏肝汤高,中剂量组大鼠痫性发作次数明显减少(P0.01)。西酞普兰,柴胡疏肝汤高,中剂量组与柴胡疏肝汤低剂量组比较,有统计学意义(P0.01)。给药前模型组大鼠痫性发作次数差异无统计学意义(P0.05)；西酞普兰组与柴胡疏肝汤高、中剂量组比较无统计学意义(P0.05)。4.药物干预4周后大鼠海马中5-HT含量及IL-1β,IL-6 mRNA表达量的变化。与模型组比较,药物干预4周后,西酞普兰组5-HT含量明显增加(P0.01),柴胡疏肝汤高,中剂量组5-HT含量增加(P0.05)；西酞普兰,柴胡疏肝汤高,中剂量组IL-1β,IL-6 mRNA表达量明显减少(P0.01)；西酞普兰组与柴胡疏肝汤高、中剂量组比较无统计学意义(P0.05)。结论1.柴胡疏肝汤高,中剂量具有下调慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马中IL-1β,IL-6 mRNA表达,促进5-HT生成,减少大鼠痫性发作次数,改善抑郁行为的作用。2.柴胡疏肝汤高,中剂量组治疗癫痫-抑郁共病与西酞普兰比较具有相似效果。
【关键词】：柴胡疏肝汤 癫痫-抑郁共病 五羟色胺 白介素-1β 白介素-6
【学位授予单位】：南方医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要3-9
• ABSTRACT9-20
• 前言20-42
• 1.1 研究癫痫-抑郁共病的意义20
• 1.2 癫痫-抑郁共病的流行病学调查20-21
• 1.3 癫痫-抑郁共病病因病机的研究进展21-25
• 1.4 癫痫-抑郁共病的治疗现状25-30
• 1.5 癫痫抑郁共病动物模型的选择30-33
• 1.6 本论文的选题依据及研究目的33-34
• 参考文献34-42
• 材料与方法42-57
• 2.1 材料42-44
• 2.2 方法44-55
• 2.3 统计学方法55-56
• 参考文献56-57
• 结果57-61
• 3.1 正常组与模型组比较,各监测指标变化57-58
• 3.2 药物干预4周后模型大鼠抑郁行为的变化58
• 3.3 药物干预4周后模型大鼠痫性发作次数的变化58-60
• 3.4 药物干预4周后大鼠海马中5-HT含量及IL-1β,IL-6 mRNA表达量的变化60-61
• 讨论61-69
• 4.1 “从肝论治”癫痫-抑郁共病的中医病机61-62
• 4.2 癫痫-抑郁共病的发病机制探讨62-64
• 4.3 柴胡疏肝汤治疗癫痫及癫痫-抑郁共病的疗效及可能机制64-65
• 参考文献65-69
• 全文小结69-70
• 攻读学位期间研究成果70-71
• 致谢71-72

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前7条

1 张峰;李发曾;;合欢花对慢性应激大鼠生长和脑单胺类神经递质含量的影响[J];动物学研究;2006年06期

2 海丽,聂恒浩;镇肝熄风汤临床验案举隅[J];辽宁中医杂志;2002年06期

3 黄运生,陈宝田;癫痫从肝论治——柴胡疏肝汤治疗癫痫108例疗效分析[J];实用中医内科杂志;2005年01期

4 刘艳萍,郭志军;中医治疗小儿癫痫的研究进展[J];天津中医学院学报;2005年01期

5 崔广智;金树梅;;芍药苷对强迫游泳小鼠脑内单胺递质的影响[J];天津中医药大学学报;2012年02期

6 李少川;;中医中药治疗小儿癫痫证治体会[J];天津中医;1997年01期

7 葛鑫宇;陈宝田;林晓春;于林;杜念念;;柴胡桂枝汤加味对大鼠抑郁模型行为学及海马区神经生长因子及脑源性神经营养因子表达的影响[J];中国老年学杂志;2011年15期

  本文关键词：柴胡疏肝汤对慢性颞叶癫痫-抑郁共病模型大鼠海马5-HT含量及IL-1β，IL-6基因表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：322548