CXCL12协同VEGF促进内皮祖细胞的增殖迁移及血管新生

发布时间：2021-07-02 13:40

　　目的:近年来干细胞移植治疗是缺血性脑卒中较有潜力的治疗手段,其中内皮祖细胞（Endothelial Progenitor Cells,EPC）也是其中一种干细胞。EPC是骨髓组织、外周血或者脐带血中,可分化为内皮细胞的多潜能性细胞,在特定条件下可诱导分化成为血管内皮细胞,具有新生血管和内皮的作用。但动物实验研究表明移植入的EPC很难在卒中后炎症、几乎不存在血管的区域存活,给临床的应用带来很多困难。所以探索EPC如何定向迁移至缺血区以及怎样向梗死区定向形成管腔样结构并与原有血管融合形成血管网络可能会为寻找到更有效的治疗方式提供新的思路。卒中后,损伤区域会释放很多细胞因子,粘附因子等,其中CXC12与VEGF是其中较为重要的因子。研究表明CXCL12可以动员、募集EPC参与血管新生,而VEGF则是参与这一过程的重要因子。所以我们猜想CXC12与VEGF之间在EPC增殖,迁移和血管生成等过程中存在协同作用以后期探索两者对缺血性卒中缺血区新生血管的定向新生和对神经功能的修复作用。方法:1.用密度梯度离心法分离脐带血中单个核细胞,接种在用人纤维连接蛋白（FN）包被过的培养瓶中,用内皮细胞专用培养... 

【文章来源】：皖南医学院安徽省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

人脐带血来源的内皮祖细胞鉴定

合VEGF组中，随着浓度的升高，EPC的增殖能力并没有持续增高，反而在100 ng/ml时出现了下降，而且两组细胞因子联合对EPC促增殖能力的作用也没有高于VEGF组，而是在 50 ng/ml 浓度时达到高峰，转而出现下降。其中图2B表示EPC的增殖能力的变化，A为各组对EPC增殖能力的影响大小。综上结果，CXCL12和VEGF对EPC的增殖能力都有促进，并且有浓度依赖性。而两 组 因 子 联 合 对 EPC 的 增 殖 作 用 并 不 是 较 强 ， 反 而 有 最 佳 浓 度 配 比 。

组细胞因子的浓度都是500 ng/ml。这三组细胞因子分别填充条带。对照组为FITC-BSA填充条带。铺上细胞30min后固定染色。红色：细胞肌动蛋白。绿色：FITC的标记的条带，蓝色：DAPI。如图3所示，对照组的EPC肌动蛋白分布较自由，与带有细胞因子的条带位置也没呈现出关系，相对于条带分布的较散乱，而CXCL12组和CXCL12联合VEGF组细胞的肌动蛋白并不像对照组那样杂乱分布，反而向条带方向趋化，形成黏着斑。而VEGF组同对照组一样，肌动蛋白的分布没有方向性的变化。为了证实上述结果，我们又设计实验如下：在常规用FN和PDL包被的transwell系统中


本文编号：3260574