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内质网应激参与低氧诱导的小鼠骨髓间充质干细胞凋亡

发布时间:2021-07-05 15:46
  目的探讨小鼠骨髓间充质干细胞(Bm MSCs)在低氧、营养剥夺条件下的凋亡机制。方法分别提取Chop+/+及Chop-/-小鼠骨髓间充质干细胞分离、培养,并用流式细胞术鉴定其表面标记。在低氧、去血清条件下诱导细胞凋亡并用AnnexinⅤ-FITC的检测方法比较两种细胞的凋亡情况。结果用流式细胞术对分离的Bm MSCs进行免疫表型分析,结果显示,两种基因型Bm MSCs CD44、Scal-1的阳性率至少为75. 74%以上,CD34、CD45的表达率皆为2%以下。AnnexinⅤ-FITC凋亡检测显示,缺氧、去血清24 h后,Chop+/+Bm MSCs AnnexinⅤ阳性细胞增多,由0 h的16. 76%±5. 87%增加到29. 51%±3. 04%(P <0. 01);而缺氧、去血清24 h条件下的Chop-/-Bm MSCs AnnexinⅤ阳性细胞为11. 12%±6. 22%,与Chop+/+比较,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论 Chop基因缺失可抑制Bm MSCs在低氧、去血清条件下的细胞凋亡,表明内质网应激途径参与了低氧、去血清条件下Bm MS... 

【文章来源】:山西医科大学学报. 2019,50(10)

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

内质网应激参与低氧诱导的小鼠骨髓间充质干细胞凋亡


WT及Chop-/-小鼠骨髓间充质干细胞基因型鉴定及形态学A.基因型鉴定B.野生型BmMSCsC.Chop-/-BmMSCs

表面标志,流式细胞术分析,间充质干细胞,凋亡


图2流式细胞术分析野生型小鼠BmMSCs表面标志物结果Figure2AnalysisoftheWTBmMSCsmarkersbyflowcytometry图3流式细胞术分析Chop-/-小鼠BmMSCs表面标志物结果图Figure3AnalysisoftheChop-/-BmMSCsmarkersbyflowcytometry2.2间充质干细胞在低氧、营养剥夺条件下的凋亡情况通过流式细胞仪检测AnnexinⅤ阳性细胞即凋亡细胞,发现缺氧、去血清24h后,AnnexinⅤ阳性细胞增多,由0h的16.76%±5.87%增加到29.51%±3.04%,差异有统计学意义(P<0.01,见图4)。表明在体外缺氧、去血清的培养条件下,间充质干细胞凋亡增多。图4流式细胞术检测野生型小鼠BmMSCs凋亡Figure4AnalysisoftheWTBmMSCsapoptosisbyflowcytometry2.3Chop基因缺失抑制小鼠骨髓间充质干细胞的凋亡在同样体外缺氧、去血清的培养条件下,Chop基因缺失小鼠骨髓间充质干细胞凋亡减少。结果显示,缺氧、去血清24h,Chop-/-基因型小鼠BmMSCsAnnexinⅤ阳性细胞仅11.12%±6.22%,与同等条件山西医科大学学报,2019年10月,第50卷第10期·5041·

表面标志,流式细胞术分析,小鼠,间充质干细胞


图2流式细胞术分析野生型小鼠BmMSCs表面标志物结果Figure2AnalysisoftheWTBmMSCsmarkersbyflowcytometry图3流式细胞术分析Chop-/-小鼠BmMSCs表面标志物结果图Figure3AnalysisoftheChop-/-BmMSCsmarkersbyflowcytometry2.2间充质干细胞在低氧、营养剥夺条件下的凋亡情况通过流式细胞仪检测AnnexinⅤ阳性细胞即凋亡细胞,发现缺氧、去血清24h后,AnnexinⅤ阳性细胞增多,由0h的16.76%±5.87%增加到29.51%±3.04%,差异有统计学意义(P<0.01,见图4)。表明在体外缺氧、去血清的培养条件下,间充质干细胞凋亡增多。图4流式细胞术检测野生型小鼠BmMSCs凋亡Figure4AnalysisoftheWTBmMSCsapoptosisbyflowcytometry2.3Chop基因缺失抑制小鼠骨髓间充质干细胞的凋亡在同样体外缺氧、去血清的培养条件下,Chop基因缺失小鼠骨髓间充质干细胞凋亡减少。结果显示,缺氧、去血清24h,Chop-/-基因型小鼠BmMSCsAnnexinⅤ阳性细胞仅11.12%±6.22%,与同等条件山西医科大学学报,2019年10月,第50卷第10期·5041·


本文编号:3266361

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